20562ES03 GST標簽蛋白純化磁珠
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 20562ES03
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/2/7 13:36:32
- 訪問次數(shù) 959
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企業(yè)簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進化技術為驅(qū)動，聚焦生命科學產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術企業(yè)，通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發(fā)路徑，成為國內(nèi)少數(shù)同時覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應用于生命科學研究領域、診斷與檢測領域和生物醫(yī)藥領域。
主營業(yè)務
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進化領域的技術優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗，構建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子、蛋白、細胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細胞分析系列、細胞培養(yǎng)系列、細胞轉(zhuǎn)染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑，廣泛應用于生命科學研究、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領域。
發(fā)展歷程
榮譽資質(zhì)
翌圣生物通過申請商標和軟件著作權的方式保障核心技術和市場競爭力，不斷加強公司品牌建設。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權18項（其中發(fā)明14項、實用新型1項、外觀設計3項）和45項與生物試劑相關的軟件著作權，擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權局商標局核準的注冊商標權37項以及4項境外注冊商標，是國家高新技術企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺
經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術經(jīng)驗的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開展“產(chǎn)學研”合作，與擁有生物催化與酶領域國家重點實驗室的湖北大學、擁有教育部工業(yè)生物領域重點研究基地的江南大學展開合作，優(yōu)化生物試劑關鍵原料的生產(chǎn)和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術、生物信息技術、細胞生物學技術、免疫學技術、生化分析技術等生命科學領域的共性生物技術為基礎，建立了六大核心技術平臺——雙向分子酶理性設計與定向進化平臺、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關鍵原料研發(fā)平臺、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺和mRNA醫(yī)藥應用研發(fā)平臺，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項核心技術，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發(fā)路徑，覆蓋技術研發(fā)、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準GMP 標準建設運營的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時，公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉儲運輸?shù)葘ιa(chǎn)線進行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶服務
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時的響應能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認可，為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學研究實驗室提供應用于科學研究、體外診斷、基因測序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學院、清華大學、北京大學、復旦大學、上海交通大學、浙江大學等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學工具領域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動產(chǎn)業(yè)變革的技術創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學習型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術創(chuàng)新和產(chǎn)品升級，不斷拓展核心技術的應用領域，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務，助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時，翌圣生物將進一步推進國際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻力量。
分子生物學試劑，細胞生物學試劑，免疫學試劑，蛋白組學試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1ml |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 20562ES03 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
GSTSep Glutathione MagBeads GST標簽蛋白純化磁珠 | 20562ES03 | 1 mL | 198.00 |
20562ES08 | 5 mL | 598.00 | |
20562ES25 | 25 mL | 1565.00 |
產(chǎn)品描述
GST標簽蛋白純化磁珠是一種專為高效、快速純化谷胱gan肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)融合蛋白而設計的一種新型超順磁性微球產(chǎn)品，具有快速磁響應性、豐富羥基官能團和粒徑相對集中等特點。該磁珠可通過磁性分離方式直接從生物樣品中一步純化出高純度的目標蛋白，極大地簡化純化工藝和提高純化效率，適合科研和工業(yè)領域便捷地進行GST 融合蛋白的純化。
本品特異性好，性價比高，可以一步從細菌、酵母菌或哺乳動物天然細胞裂解物中純化谷胱gan肽-S-轉(zhuǎn)移酶、谷胱gan肽依賴性蛋白和谷胱gan肽重組衍生物。GST是重組蛋白制備過程中常用的一種標簽蛋白，以輔助目的蛋白表達、檢測、純化。
同時，在使用磁性分離法的Pull-down實驗中，充當“誘餌蛋白”的重組GST融合蛋白通過親和作用與磁珠結(jié)合，當目標蛋白與固相載體混合時，就可被誘餌蛋白吸附，在磁力下，目標蛋白就從表達體系中分離出來，使用該磁珠進行GST Pull-down實驗，由于磁性分離不需要多次離心和較長的孵育時間，與傳統(tǒng)的層析法相比，操作更簡單、快速和自動化。
產(chǎn)品性質(zhì)
基質(zhì) | 磁性瓊脂糖微球 |
配體 | Glutathione (谷胱gan肽) |
載量 | 5-10 mg GST標簽融合蛋白/ mL磁珠 |
粒徑 | 30-100 μm |
磁珠濃度 | 磁珠懸浮于保護液中，含量為20% |
儲存緩沖液 | 含20%乙醇的1×PBS |
運輸和保存方法
冰袋運輸。4℃長期儲存，有效期2年。
注意事項
1.磁珠保存過程中避免冷凍、干燥和高速離心等操作。
2.磁珠使用前，請充分震蕩，使磁珠保持均勻的懸浮狀態(tài)。
3.使用過的磁珠重復使用時，建議純化同一種蛋白，純化不同種蛋白時，建議使用新磁珠，以避免交叉污染。
4.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5.本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用方法
一、緩沖液配制
1.平衡液/洗雜液：PBS, pH 7.4 (140 mM NaCI, 2.7 mM KCI, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.4）
2.洗脫液：50 mM Tris-HCl, 10 mM-20 mM還原型谷胱gan肽，pH 8.0
二、樣本制備
【注】樣品在上樣前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾，減少雜質(zhì)。
2.1細菌或酵母表達的蛋白
將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移到離心杯中，7,000 rpm (7,500 xg)，離心15 min收集菌體，然后按照菌體：平衡液=1: 10 （W/V）加入平衡液，加入終濃度為1 mM的PMSF。加入溶菌mei，使其工作濃度為0.2-0.4 mg/mL。如果表達的宿主細胞內(nèi)含pLysS或pLysE，可以不加溶菌mei。谷胱gan肽同時也可加入其他蛋白酶抑制劑，但不能影響目的蛋白與磁珠的結(jié)合。
1）將菌體沉淀懸浮起來，（如果菌液濃度高，也可考慮加入10 μg/mL RNase A和5 μg/mL DNase I）,混勻，冰上超聲破碎細胞，至菌液基本保持澄清。
2）將澄清的破碎液轉(zhuǎn)移至離心管中，10,000 rpm (15,000 xg)，4℃離心20-30 min。 取上清，置于冰上備用或-20℃保存。
2.2酵母、昆蟲和哺乳細胞分泌表達可溶性蛋白
1）將細胞培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心杯中，5,000 rpm (3,800 xg)，離心10 min，收集菌體得上清，即可直接使用。
2）對于大量體積的上清，需加入硫酸銨沉淀濃縮后，然后用Lysis Buffer透析后才能上樣。
三、磁珠準備
1.可根據(jù)目標蛋白產(chǎn)量和磁珠載量信息來準備適量的磁珠（磁珠體積為總體積的20%）,將磁珠反復顛倒，充分混勻，使用移液器取適量的磁珠懸浮液，置于離心管中，將離心管置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，用移液器吸棄清液。
2.將離心管從磁分離器上取下來，加入與懸浮液等體積的平衡液，使用槍頭反復吹打5次，將離心管置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，用移液器吸棄清液，重復洗滌2次。
四、GST標簽蛋白純化
1. 結(jié)合 將備好的樣本加入到處理好的磁珠中，反復顛倒混勻。將離心管置于混合儀上，室溫孵育30 min以上（也可根據(jù)結(jié)合效果調(diào)整，延長孵育時間）。
2. 洗雜 將離心管置于磁分離器，大約1 min，待溶液變澄清后，用移液器移出上清液，保留，以備取樣檢測。向離心管中加入5倍懸浮液體積的洗雜液，使用槍頭反復吹打5次，將離心管置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，用移液器吸棄上清液。至少重復上述步驟2次。
3. 洗脫 在上述離心管中加入3-5倍磁珠體積的洗脫液，用移液器吹打5次，然后在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管，5-10 min后，置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，吸取上清液，收集洗脫組分，即為目標蛋白。重復操作兩次，分別收集洗脫組分，留待檢測。
4.磁珠保存 使用后的磁珠用1 mL洗脫液重懸磁珠，然后置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，吸棄上清液。該操作重復兩次。 再加入1 mL平衡液，懸浮磁珠，然后置于磁分離器上，大約1 min,待溶液變澄清后，吸棄上清液。再加入4倍磁珠體積的20%乙醇，置于4℃保存。
五、Pull-Down 實驗
1.磁珠結(jié)合誘餌蛋白 將含有GST標簽誘餌蛋白的樣品加入到備好的磁珠中，顛倒混勻。將離心管置于混合儀上，室溫孵育30 min以上（時間可根據(jù)結(jié)合效果調(diào)整）。
洗雜 將離心管置于磁分離器，大約1min，待溶液變澄清后，用移液器移出上清液，保留，以備取樣檢測。向離心管中加入5倍懸浮液體積的洗雜液，使用槍頭反復吹打5-10次，將離心管置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，用移液器吸棄上清液。重復上述步驟2次。 即得到GST誘餌蛋白-磁珠復合物。
3.目標蛋白與誘餌蛋白-磁珠復合物結(jié)合 將含有目標蛋白的樣品加入到處理好的誘餌蛋白-磁珠復合物中，顛倒混勻。將離心管置于混合儀上，室溫孵育30 min以上（時間可根據(jù)結(jié)合效果調(diào)整）。
4.洗雜 將離心管置于磁分離器，大約1 min，待溶液變澄清后，用移液器移出上清液，保留，以備取樣檢測。向離心管中加入5倍懸浮液體積的洗雜液，使用槍頭反復吹打5-10次，將離心管置于磁分離器上，大約1 min,待溶液變澄清后，用移液器吸棄上清液。重復上述步驟2次。 目標蛋白通過與誘餌蛋白的結(jié)合，從混合體系中被捕獲。
5.目的蛋白的洗脫 在上述離心管中加入3-5倍磁珠體積的洗脫液，用移液器吹打5次，然后在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管，5-10 min后， 置于磁分離器上，大約1 min，待溶液變澄清后，吸取上清液，收集洗脫組分，即得到靶蛋白和目標蛋白復合物。再重復操作兩次，分別收集洗脫組分，留待檢測。
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