免疫組化顯色試劑盒訂貨信息

通用型免疫組化試劑盒CSK1003，適用于人及動物組織，一抗來源為兔或者小鼠，適用效果與進口品牌對等。

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產(chǎn)品說明書

【產(chǎn)品名稱】

免疫顯色試劑盒（通用4組分）

【產(chǎn)品貨號】

CSK1003-2mL/CSK1003-20mL/ CSK1003-100mL

【主要組成成分】




組成	成分	規(guī)格
		CSK1003-2mL	CSK1003-20mL	CSK1003-100mL
試劑1	內(nèi)源性過氧化物酶封閉劑	2mL	20mL	100mL
試劑2	HRP酶標二抗聚合物	2mL	20mL	100mL
試劑3	DAB底物（20X）	0.1mL	1mL	5mL
試劑4	底物緩沖液	2mL	20mL	100mL






















【預(yù)期用途】

該試劑僅供科研使用。主要用于免疫組織化學(xué)的顯色反應(yīng)。

【檢測原理】

此試劑盒是利用抗體與切片中的靶抗原形成抗原抗體復(fù)合物，再通過HRP酶標抗小鼠/兔聚合物（以多聚氨基酸為骨架，辣根過氧化物酶與抗小鼠/兔IgG-Fab’片段形成的多聚合物）與抗原抗體復(fù)合物中的抗體結(jié)合，最后辣根過氧化物酶催化二*基lian苯*（DAB）在抗原部位形成棕色沉淀，并可借助顯微鏡觀察其顏色變化，從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織、細胞的結(jié)構(gòu)。

【儲存條件及有效期】

2~8℃儲存，避免冰凍。有效期為12個月。

【檢驗方法】

1.檢驗所需儀器、設(shè)備

移液器、免疫組化油筆、計時器、干燥箱、孵育盒、染色架、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、洗瓶。

2.溶液配制

DAB顯色液：使用DAB底物緩沖液將DAB底物（20X）稀釋20倍。避光存放，現(xiàn)配現(xiàn)用。

3.試驗溫度條件

室溫，18~25℃

4.實驗步驟

4.1脫蠟和水化

石蠟切片置于新鮮的二甲苯中，浸泡2次，10min/次，；

除去多余的液體后，置于無水乙醇中，浸泡2次，5min/次，；

除去多余的液體后，置于95%乙醇中，浸泡5min；

除去多余的液體后，置于85%乙醇中，浸泡5min；

自來水沖洗3次, 3min/次。

4.2抗原修復(fù)：參照一抗抗體說明書進行。

4.3加內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑

將抗原修復(fù)后的切片用自來水沖洗3次，3min/次，用油筆圈定玻片上的待測組織區(qū)域，TBS清洗液沖洗1次，3min/次；除去TBS清洗液，在樣本區(qū)域加入80-100μL（試劑量視切片大小，以全覆蓋切片組織為宜，前后試劑量保持一致，下同）內(nèi)源性過氧化酶封閉劑，室溫孵育5min；TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.4加抗體

除去TBS清洗液，加入80-100μL一抗，室溫孵育60min；TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.5加HRP酶標二抗聚合物

除去TBS清洗液，加入80-100μL酶標二抗聚合物，室溫孵育30min。TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.6顯色

除去TBS清洗液，加入80-100μL新鮮配制的DAB顯色液，室溫孵育5min。

4.7復(fù)染

自來水沖洗，加80-100μL蘇木素，室溫孵育1-3min；自來水沖洗返藍。

4.8脫水、透明、封片

置于85%乙醇中，浸泡2min；

置于95%乙醇中，浸泡2min；

置于無水乙醇中，浸泡2次,2min/次；

二甲*透明，浸泡2次,2min/次；

中性樹膠和蓋破片封片。

4.9光學(xué)顯微鏡閱片

【檢驗方法的局限性】

1. 免疫組織化學(xué)試驗中，試劑選取、樣本固定、處理，切片準備及染色結(jié)果解釋等都必須進過嚴格的專業(yè)培訓(xùn)；專業(yè)的操作人員、經(jīng)過認證的實驗室將有助于實驗檢測過程的標準化，從而減少由于外界因素造成的染色偏差。

2. 染色前組織的處理直接影響染色效果。不恰當?shù)墓潭ā⒈鶅?、熔化、清洗、烘干、切片或被其他組織或液體污染都會造成假陽性、抗體定位不準確或假陰性結(jié)果。固定和包埋方法的不同或組織內(nèi)部的不規(guī)則也可能造成異常的染色結(jié)果。

3. 過度或不足的復(fù)染都會影響結(jié)果的正確解釋。

4. 該試劑盒僅對10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋的組織進行了驗證，不得用于其它樣本類型或流式細胞檢測等其它用途。

【注意事項】

1. 該試劑盒僅供科研使用。

2. 實驗開始前，應(yīng)仔細閱讀說明書。

3. 該試劑必須是經(jīng)過嚴格培訓(xùn)的專業(yè)人員在有效期內(nèi)使用，如發(fā)現(xiàn)漏液、污染或變質(zhì)，請勿使用。

4. 該試劑使用應(yīng)采取適當?shù)姆雷o措施，避免試劑同皮膚和眼睛接觸，禁止口吸試劑，若皮膚、粘膜等身體部位接觸該試劑，及時使用大量水沖洗。

5. 抗原修復(fù)、孵育時間、溫度條件或應(yīng)用其他方法均可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。

6. 樣本室溫保存時，應(yīng)在封存7天內(nèi)染色。否則會因為時間長久，導(dǎo)致組織中抗原退變產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

7. DAB有潛在致突變作用，在使用過程中應(yīng)特別注意安全防護措施外，對其使用后的廢液存放和去毒性處理也應(yīng)符合相關(guān)法律法規(guī)要求。

8. 該試劑是否應(yīng)用于非福爾馬林固定組織還未得到證實。

9. 【基本信息】生產(chǎn)企業(yè)：賽諾特生物技術(shù)（蘇州）有限公司

   【生產(chǎn)日期及使用期限】詳見標簽