為什么Edman降解仍然重要？探索其不可替代的應(yīng)用場景檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在質(zhì)譜技術(shù)主導(dǎo)dànbáizhì組學(xué)的時代，Edman降解似乎成了“過去式”。但事實并非如此。作為一種經(jīng)典且jīngzhǔn的N端dànbáizhì測序方法，Edman降解在多個關(guān)鍵場景中依然有著bùkětìdài的價值，尤其是在dànbáizhì結(jié)構(gòu)驗證、藥物質(zhì)量控制以及非模式生物的研究中。本文將深入解析Edman降解的原理與優(yōu)勢，剖析其在現(xiàn)代科研與生物醫(yī)藥中的dútè應(yīng)用場景，并探討如何與質(zhì)譜技術(shù)形成互補，發(fā)揮zuì大效能。

一、什么是Edman降解？

Edman降解是一種用于確定dànbáizhì或多肽N端氨基酸序列的化學(xué)方法，由瑞典生物化學(xué)家Pehr Edman于1950年開發(fā)。其基本原理包括三步：

1、N端氨基酸與苯異硫氰酸（PITC）反應(yīng)；

2、形成環(huán)狀衍生物并在酸性條件下斷裂，釋放出shǒugè氨基酸（以PTH衍生物形式）；

3、使用HPLC對PTH-氨基酸進行鑒定。

??這種逐步“讀取”N端序列的方式，zuì多可測定約30個氨基酸，在高純度樣品中具有jígāo的準(zhǔn)確率。

二、為什么Edman降解仍然bùkěhuòquē？

盡管質(zhì)譜具有高通量和高靈敏度等優(yōu)勢，但在以下幾個關(guān)鍵應(yīng)用中，Edman降解仍展現(xiàn)出其他方法難以替代的dútè價值：

1、N端驗證：確保蛋白翻譯起始位點準(zhǔn)確

在表達與純化dànbáizhì時，科學(xué)家常常需要確認(rèn)是否從正確的起始密碼子開始翻譯，是否存在N端延伸或截斷。這在設(shè)計功能蛋白、重組抗體、疫苗時尤為關(guān)鍵。

• 質(zhì)譜在識別復(fù)雜翻譯后修飾或N端微小變化時可能受限；

• 而Edman降解能直接讀取N端序列本身，無需依賴數(shù)據(jù)庫，結(jié)論更具確定性。

??典型應(yīng)用：確認(rèn)抗體重鏈/輕鏈?zhǔn)欠裼蓄~外的起始氨基酸，判斷表達系統(tǒng)中信號肽是否被準(zhǔn)確切除。

2、蛋白藥物研發(fā)與生產(chǎn)：構(gòu)建穩(wěn)定可靠的質(zhì)量體系

在生物藥開發(fā)過程中，dànbáizhì結(jié)構(gòu)一致性是質(zhì)量控制的核心環(huán)節(jié)。無論是藥物發(fā)現(xiàn)階段的初始篩選，還是后期的中試放大與生產(chǎn)批次穩(wěn)定性評估，Nduāncèxù都是重要的驗證手段。

• Edman降解可用于確認(rèn)dànbáizhì起始序列是否符合設(shè)計；

• 幫助研發(fā)人員判斷表達系統(tǒng)是否導(dǎo)致非預(yù)期的氨基酸修飾或切除。

3、凝膠條帶鑒定：驗證目標(biāo)蛋白身份，排查雜帶干擾

在SDS-PAGE或2D凝膠中，即使某條蛋白條帶看似純凈，其真實組成仍可能包含多種蛋白。直接將條帶切下并進行Edman測序，可以快速判斷其主成分是否為目標(biāo)蛋白。

• 不同于質(zhì)譜常見的“混合肽段分析”，Edman可線性讀取蛋白N端序列，對單一主帶蛋白尤為jīngzhǔn；

• 在抗原制備、蛋白純度驗證等實驗中，提供直觀可追溯的結(jié)構(gòu)信息。

4、非模式生物研究：無需數(shù)據(jù)庫，獲取原始序列信息

質(zhì)譜依賴數(shù)據(jù)庫進行肽段匹配，而對于尚無完整基因組信息的非模式物種（如某些植物、微生物或海洋生物），這種方法存在明顯局限。

• Edman降解則以化學(xué)方式直接讀取N端序列，不依賴任何背景信息；

• 是非模式物種中新蛋白發(fā)現(xiàn)與初步結(jié)構(gòu)鑒定的重要手段。

三、Edman降解的局限性及zuìjiā應(yīng)用策略

雖然Edman降解具有dútè優(yōu)勢，但它也存在一些技術(shù)限制：

因此，科研和工業(yè)界更傾向于采用“Edman + 質(zhì)譜”雙策略：

• 用Edman降解jīngquè定義dànbáizhìN端序列；

• 用質(zhì)譜補足中段與C端序列，實現(xiàn)全序列確認(rèn)。

Edman降解依然是dànbáizhì測序中zuì具確定性的一環(huán)，在對結(jié)果精度要求jígāo的場景下，它不僅是對質(zhì)譜結(jié)果的重要補充，更是某些關(guān)鍵節(jié)點上的“wéiyī選擇”。百泰派克生物科技致力于提供高質(zhì)量的基于Edman降解的蛋白N端序列分析服務(wù)，幫助科研與產(chǎn)業(yè)客戶提升數(shù)據(jù)可信度，加快研發(fā)進程。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)先進，填補技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

為什么Edman降解仍然重要？探索其不可替代的應(yīng)用場景檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹