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近年來(lái)，隨著畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，抗生素的濫用引起了廣泛的關(guān)注。四環(huán)素類抗生素是一種由放線菌產(chǎn)生的廣譜抗菌素，喹諾酮是通過(guò)抑制DNA旋轉(zhuǎn)酶的活性殺滅細(xì)菌的一類人工合成化合物，磺胺類可以對(duì)于細(xì)菌感染類疾病進(jìn)行有效治療，這三類抗生素在養(yǎng)殖業(yè)中被廣泛用于預(yù)防、治療畜禽、水產(chǎn)的疾病和促進(jìn)生長(zhǎng)。由于抗生素在動(dòng)物機(jī)體組織中的殘留，人食用動(dòng)物組織后抗生素在人體內(nèi)殘留、蓄積，造成人體對(duì)該藥的耐藥性，破壞腸道菌群，影響人體的免疫系統(tǒng)。因此，動(dòng)物源食品中的抗生素類化合物分析具有重要意義。

今年2月開(kāi)始實(shí)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 31658.17--2021食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法》，該方法具有靈敏度高，選擇性和特異性好的優(yōu)勢(shì)，可以對(duì)低濃度的三類抗生素同時(shí)進(jìn)行定量分析，滿足豬肉中此三類抗生素的檢測(cè)需求。本應(yīng)用中心根據(jù)《GB 31658.17--2021》，建立了使用超高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定豬肉中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類化合物含量快速且高靈敏度的檢測(cè)方法，為食品安全檢測(cè)提供有效技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞：LC-MS/MS、食品、四環(huán)素、磺胺、喹諾酮、抗生素類獸殘、GB 31658.17-2021

實(shí)驗(yàn)部分

儀器

表1 液相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀

表2 正離子檢測(cè)化合物液相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀檢測(cè)參數(shù)

試劑及標(biāo)準(zhǔn)品

      試劑：質(zhì)譜級(jí)甲酸（CNW）、色譜級(jí)甲醇（Merck）；

      純水：18.2 MΩ·cm去離子水（25℃）；

      標(biāo)準(zhǔn)品：四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自上海安譜標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)天津阿爾塔。

樣品前處理

      按照《GB 31658.17--2021食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法》“8 測(cè)定步驟”中的步驟進(jìn)行樣品前處理，本次實(shí)驗(yàn)選用市售豬肉做為空白基質(zhì)。

檢出限

表3 四環(huán)素類、磺胺類以及喹諾酮類藥物的檢出限和定量限

      按照國(guó)標(biāo)前處理方式制備豬肉基質(zhì)加標(biāo)樣品提取液，加標(biāo)濃度分別為國(guó)標(biāo)規(guī)定的方法檢出限和定量限，即2μg/kg和10μg/kg，進(jìn)樣后計(jì)算信噪比，結(jié)果如表3所示，2μg/kg的樣品提取液各化合物信噪比均遠(yuǎn)大于3，10μg/kg的樣品提取液各化合物信噪比均遠(yuǎn)大于10。

圖2 2μg/kg豬肉基質(zhì)加標(biāo)樣品提取液各化合物定量離子圖譜

圖3 10μg/kg豬肉基質(zhì)加標(biāo)樣品提取液各化合物定量離子圖譜

測(cè)試結(jié)果

結(jié)語(yǔ)

    豬肉樣本經(jīng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 31658.17—2021》前處理后，使用LC-MS/MS系統(tǒng)測(cè)定四環(huán)素類、磺胺類以及喹諾酮類藥物殘留量。本文考察了方法的線性、檢出限、精密度以及加標(biāo)回收率等，測(cè)試結(jié)果顯示各類指標(biāo)均符合國(guó)標(biāo)要求，使用高靈敏、高抗污染能力的LC-MS/MS系統(tǒng)，可以對(duì)動(dòng)物性食品中四環(huán)素類、磺胺類以及喹諾酮類藥物含量進(jìn)行靈敏、準(zhǔn)確的定量檢測(cè)。

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•    附錄

設(shè)備與耗材方案

一、EXPEC 5210配置詳情

二、標(biāo)準(zhǔn)品

• 液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀

  檢測(cè)儀器在線詢價(jià)