葉綠素測(cè)定儀主要是用于無損檢測(cè)植物葉綠素和葉面溫度，帶有上位機(jī)軟件能。
簡(jiǎn)介
?根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A＝αCL式中：α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在某波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)定波長(zhǎng)下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的zui大吸收峰。
原理
近年來,隨著人們對(duì)農(nóng)業(yè)地區(qū)地表水和地下水污染的日益關(guān)注,如何準(zhǔn)確地對(duì)作物行氮肥變得越來越重要。很多測(cè)試方法都包括土壤、植物采樣,樣品處理和室內(nèi)常規(guī)分析或田間簡(jiǎn)易設(shè)備測(cè)定等步驟。其共同的不足之處就在于都要求樣品的采集和處理,從樣品采集到提供測(cè)試結(jié)果需要段時(shí)間。另外許多大田作物在缺氮時(shí)會(huì)表現(xiàn)出些肉眼可見的癥狀,如玉米在缺氮脅迫下,氮從老葉向幼葉轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致老葉失綠;相反,供氮過量的植株,葉片顏色深綠,并且延遲作物衰老。通過觀測(cè)葉片顏色變化來評(píng)價(jià)作物氮營(yíng)養(yǎng)狀況已經(jīng)在中獲得應(yīng)用。利用葉色作為施肥標(biāo)zui初是在水稻上開始應(yīng)用,因?yàn)樵S多應(yīng)用于旱地作物的土壤和植株診斷方法不適合于水稻。同時(shí)葉色也是水稻氮營(yíng)養(yǎng)敏感的標(biāo),葉色與葉片含氮量呈正相關(guān)。應(yīng)用葉色測(cè)定植物氮營(yíng)養(yǎng)狀況經(jīng)歷了幾個(gè)發(fā)展階段:①測(cè)定光的不同性;②通過常規(guī)浸提方法測(cè)定葉綠素含量;③利用標(biāo)準(zhǔn)比色卡葉色深淺;④測(cè)定光的通過率來反映葉色深淺。水稻種植者常用肉眼觀測(cè)葉色變化來判斷是否缺肥,但是用目視方法來判斷綠色深淺受光線影響,屬于相對(duì)和非定量的方法。Nadazui早利用光的發(fā)射比率來定量葉色，此后通過葉片顏色來預(yù)知植物氮素營(yíng)養(yǎng)狀況的研究越來越多。而就在這時(shí)，種基于測(cè)定葉片葉綠素相對(duì)含量的便攜式葉綠素儀測(cè)量方法引起了大家的關(guān)注。隨著不斷的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，葉綠素檢測(cè)儀已經(jīng)能夠很好的測(cè)定作物的氮肥缺失，而且在水稻、蘋果、棉花等作物上得到了廣泛的應(yīng)用。
材料、儀器設(shè)備及試劑
（）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。
（二）儀器設(shè)備：1. 分光光度計(jì)；2. 電子載天平（感量0.01g）；3. 研缽；5. 小漏斗；6. 定量濾紙；7. 吸水紙；8. 擦境紙；9. 滴管。
（三）試劑：96％乙醇（或80％丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎（去掉中脈），混勻。2. 稱取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95％乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3～5min。3. 取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤(rùn)，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，zui后連同殘?jiān)鸬谷肼┒分小?. 用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o綠色為止。zui后用乙醇定容至25ml，搖勻。5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95％乙醇為，在波長(zhǎng)665nm、649nm下測(cè)定吸光度。
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算：將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.9665－6.88A649；Cb=24.96A649－7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度（Ca、Cb：mg/L），二者之和為總?cè)~綠素的濃度。zui后根據(jù)下式可步求出植物組織中葉綠素的含量：
葉綠素的含量（mg/g）= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重（或干重）
儀器用途
葉綠素測(cè)定儀可以即時(shí)測(cè)量植物的葉綠素相對(duì)含量（單位SPAD）或綠色程度、葉面溫度，從而解植物真實(shí)的硝基需求量并且了解土壤硝基的缺乏程度或是否過多地施加了氮肥?？梢酝ㄟ^此款儀器來增加氮肥的利用率，并可保護(hù)環(huán)境?？蓮V泛應(yīng)用于農(nóng)林相關(guān)科研單位和校對(duì)植物生理標(biāo)的研究和農(nóng)業(yè)的導(dǎo)。
能點(diǎn)
葉綠素測(cè)定儀TYS-A可同時(shí)測(cè)量葉綠素、葉面溫度兩個(gè)參數(shù)。
快速無損植物活體檢測(cè)，不影響植物成長(zhǎng)。
次操作可同時(shí)測(cè)定所有參數(shù)，實(shí)時(shí)顯示，且可同時(shí)儲(chǔ)存
歷史數(shù)據(jù)查看，即可順序查看，也可跳轉(zhuǎn)查看。
歷史數(shù)據(jù)查看，即可順序查看，也可跳轉(zhuǎn)查看。
意外斷電后已保存在主機(jī)里的數(shù)據(jù)不丟失。
對(duì)于歷史數(shù)據(jù)即可逐條刪除，也可以鍵式刪除。
使用鋰電池供電，帶背光能。
中英文鍵式切換。
上位機(jī)軟件能（TYS-B型）
每種參數(shù)的報(bào)表、曲線圖均可選擇時(shí)段查詢查看。
顯示每種參數(shù)過程曲線趨勢(shì)，zui大值、zui小值、平均值顯示查看，放大、縮小能。
可將存儲(chǔ)記錄的數(shù)據(jù)以EXCEL格式備份保存，方便以后調(diào)用。
可將存儲(chǔ)記錄的數(shù)據(jù)曲線圖以BMP圖片格式備份保存，方便以后調(diào)用。
