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膠體金免疫層析分析儀是一種基于膠體金標(biāo)記技術(shù)的便攜式快速檢測設(shè)備,廣泛應(yīng)用于臨床診斷、食品安全、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。其核心原理結(jié)合了抗原-抗體特異性結(jié)合與膠體金的顯色特性,通過層析技術(shù)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物質(zhì)的快速分離與檢測。
一、核心原理
膠體金是由氯金酸(HAuCl2)還原形成的納米級(jí)金顆粒(直徑1-100nm),表面帶負(fù)電荷,可通過靜電作用與蛋白質(zhì)(如抗體)結(jié)合,形成穩(wěn)定的膠體金-抗體復(fù)合物。膠體金在可見光范圍內(nèi)呈現(xiàn)紅色或紫色,且顏色深淺與金顆粒濃度成正比,可通過肉眼或儀器定量分析。
免疫層析技術(shù)
層析膜結(jié)構(gòu):通常由樣品墊、結(jié)合墊、硝酸纖維素膜(NC膜)和吸收墊組成。
結(jié)合墊:固定膠體金標(biāo)記的抗體(如抗目標(biāo)抗原的抗體)。
NC膜:包含兩條關(guān)鍵線:
檢測線(T線):包被捕獲抗體(與目標(biāo)抗原結(jié)合)。
質(zhì)控線(C線):包被抗膠體金抗體的二抗(確保層析過程有效)。
檢測流程:
樣品(如血液、尿液、唾液)滴加到樣品墊,通過毛細(xì)作用向吸收墊方向遷移。
樣品中的目標(biāo)抗原與結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合,形成復(fù)合物。
復(fù)合物遷移至T線時(shí),被捕獲抗體固定,形成“抗體-抗原-膠體金抗體”三明治結(jié)構(gòu),T線顯色。
未結(jié)合的膠體金抗體繼續(xù)遷移至C線,與二抗結(jié)合顯色,作為質(zhì)控標(biāo)志。
通過儀器或肉眼觀察T/C線的顯色強(qiáng)度,定量或定性分析目標(biāo)物質(zhì)濃度。
二、膠體金免疫層析分析儀的優(yōu)勢特點(diǎn)
1.檢測時(shí)間通常在5-10分鐘內(nèi)完成,適用于現(xiàn)場即時(shí)檢測(POCT),如傳染病篩查、檢測等。
2.無需復(fù)雜前處理,非專業(yè)人員經(jīng)簡單培訓(xùn)即可操作,降低技術(shù)門檻。
3.膠體金標(biāo)記抗體可特異性識(shí)別目標(biāo)抗原,結(jié)合層析分離技術(shù),有效排除干擾物質(zhì),靈敏度可達(dá)ng/mL級(jí)別。
4.設(shè)備體積小、重量輕,適合基層醫(yī)療、野外作業(yè)或資源有限地區(qū)使用。
5.單次檢測成本低,無需昂貴儀器或試劑,適合大規(guī)模篩查。
6.顯色結(jié)果可通過肉眼直接判斷(定性檢測),或通過儀器(如反射光度計(jì))定量分析,提高結(jié)果可靠性。
