在基因工程實(shí)驗(yàn)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,細(xì)菌是*的實(shí)驗(yàn)材料。質(zhì)粒的保存、增殖和轉(zhuǎn)化;基因文庫的建立等都離不開細(xì)菌。特別是常用的大腸桿菌。大腸桿菌是含有長約3000kb的環(huán)狀染色體的棒狀細(xì)胞。它能在僅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的無機(jī)鹽的培養(yǎng)基上快速生長。當(dāng)大腸桿菌在培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,其開始裂殖前,入一個滯后期。然后進(jìn)入對數(shù)生長期,以20~30min復(fù)制一代的速度增殖。后,當(dāng)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和氧耗盡或當(dāng)培養(yǎng)基中廢物的含量達(dá)到抑制細(xì)菌的快速生長的濃度時,菌體密度就達(dá)到一個比較恒定的值,這一時期叫做細(xì)菌生長的飽和期。此時菌體密度可達(dá)到1×109~2×109/mL。培養(yǎng)基可以是固體的培養(yǎng)基,也可以是液體培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)室中常用的是LB培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)試劑
1、胰蛋白胨
2、酵母提取物
3、氯化鈉
4、1mol/L NaOH
5、瓊脂粉
6、抗生素(氨芐青霉素、卡那霉素等)
1、培養(yǎng)皿
2、帶帽試管
3、涂布器
4、滅菌鍋
5、無菌操作臺(含酒精燈、接種環(huán)、滅菌牙簽等)
6、恒溫?fù)u床
實(shí)驗(yàn)材料
大腸桿菌
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WORD 文檔 |
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