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大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3ELISA試劑盒

閱讀:742      發(fā)布時間:2012-08-24
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大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3ELISA試劑盒

神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)是神經(jīng)生長因子基因家族起著重要的作用,這在脊椎動物的神經(jīng)系統(tǒng)的開發(fā)和維護的一個新成員。NT-3和受體,神經(jīng)酪氨酸激酶受體3(NTRK3,也稱為元TrkC),和整個胚胎發(fā)育早期表示。NT-3是一個5的神經(jīng)營養(yǎng)因子的生長因子,塑造通過調(diào)節(jié)神經(jīng)元的存活和分化的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)展。NT-3可以是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)源性因子介導(dǎo)神經(jīng)嵴(NC)的細胞增殖,在體內(nèi)。NT-3已被映射到人類染色體12p和小鼠染色體6。

產(chǎn)品代碼: 2901180015,2901180045

大小:  96T,48T

范圍:   15.6pg/ml-1000pg/ml
靈敏度:    <2pg/ml中心
特異性:  沒有檢測到交叉反應(yīng)性與NT-4 <2.5%,沒有檢測到與任何其他細胞因子的交叉反應(yīng)性。
儲存:       存放在4 ℃ 的頻繁使用,在-20 ℃ 很少使用。  避免多次凍融循環(huán)(隨用濕冰)
有效期: 4個月,在4 ℃ 和8個月,在-20 ℃ 。
應(yīng)用范圍:  對于定量檢測在大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3 的血清,血漿,體液,組織裂解物或細胞培養(yǎng)物上清。
注意事項應(yīng)用套件
1 。在使用試劑盒,旋轉(zhuǎn)管到管底,并關(guān)閉所有元件。
2 。重復(fù)以及檢測標準和樣品測試。
3 ,不要讓96孔板中干,干板將活性成分失活板。
4 。為了避免邊際效應(yīng)的板孵化,由于溫度差(反應(yīng)可能會更強的邊際井),ABC和TMB的解決方案攤薄預(yù)先加熱,在37 ℃ 30分鐘前使用。
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3 ELISA試劑盒實驗步驟:
 
ABC工作液和TMB彩色顯影劑必須在使用前30分鐘在37℃下保溫。稀釋樣品和試劑時,必須將它們*和均勻地混合。標準曲線。用戶將決定由粗略的估計中的樣品稀釋倍。
 
1。每孔分裝0.1毫升1000pg/ml,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.2pg/ml,15.6pg/ml大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3 到預(yù)涂的96孔板中的標準溶液。加入0.1ml的樣品稀釋緩沖液控制(零井)。每個人血清,血漿,體液,組織裂解物或細胞培養(yǎng)上清液適當(dāng)稀釋后的樣品加入0.1ml的每個空的。“樣品稀釋指引”上面的內(nèi)容,我們建議每個神經(jīng)營養(yǎng)因子-3 標準的解決方案,每個樣本一式兩份測定。 
2。密封板與蓋和在37℃下孵育90分鐘。 
3。取下蓋子,舍棄板的內(nèi)容,涂抹到紙巾或其它吸水材料板。不要讓我們的井*干燥,在任何時候。 
4。加入0.1ml的生物素標記的抗大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3 抗體工作溶液導(dǎo)入各孔中,并 在37℃下孵育板60分鐘。 
5。三次用0.01M TBS或0.01M PBS洗板,每一次讓留在洗滌緩沖液井1分鐘。棄去洗滌液,或其他吸水紙巾上吸干板材料。  
6。導(dǎo)入各孔中,并加入0.1ml的制備ABC工作液,在37℃下孵育板30分鐘。 
7。將板洗滌5次,用0.01M TBS或0.01M PBS,每一次讓洗滌緩沖液的孔中逗留1-2分鐘。棄去洗滌液和紙巾或其它吸水材料上涂抹板。 
8。90微升制備TMB底彩色顯影劑添加到每個孔中并孵育板在37℃下15分鐘(深淺不一的藍,可以看到在井的四個集中的大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3 標準的解決方案, 其他水井沒有明顯的顏色)。 
9。每孔加入0.1ml的準備TMB的一站式解決方案。顏色立即變成黃色。 
10。閱讀的OD在酶標儀在450nm處的吸光度,添加停止溶液后,在30分鐘之內(nèi)。
 
為了計算,(相對OD 450 )=(的OD 450 ) - (的OD 450 )??梢岳L制成的相對OD 標準曲線。的大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3的濃度的樣品可以被內(nèi)插。      
 
注:如果測量的樣品進行稀釋,稀釋前,乘以稀釋倍數(shù)的濃度插值獲得的濃度。
 

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