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檸檬酸（CA）含量測(cè)定樣本的前處理
點(diǎn)擊次數(shù)：1238 發(fā)布時(shí)間：2021-8-26
檸檬酸（CA）含量測(cè)定樣本的前處理：
組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：
①稱取約0.1g組織或收集500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞，加入1mL試劑一和10uL?試劑三，用冰浴勻漿 器或研缽勻漿。
②將勻漿600g，4℃離心5min。
③棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心10min。
④上清液即胞漿提取物，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的α-KGDH（此步可選做）。
⑤在步驟④的沉淀中加入200uL試劑二和2uL?試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W， 超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），用于線粒體α-KGDH活性測(cè)定。
測(cè)定原理：α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+?和輔酶A生成琥珀酰輔酶A、二氧化碳和?NADH，NADH在340?nm有特征吸收峰，以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶DYRK2抗體
鋅指結(jié)構(gòu)蛋白酶20抗體
C型凝集素受體CLEC13A抗體
雙甲基精氨酸水解酶2抗體
D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體
雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶3抗體
肌營(yíng)養(yǎng)蛋白α抗體
多巴胺β羥化酶抗體
抑癌基因抗體
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體
死亡受體3抗體
死亡受體4抗體
精神分裂癥易感基因抗體
蓬亂蛋白1抗體
異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體
結(jié)蛋白抗體
DISC1 C端抗體
DISC1 N端抗體
多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體
結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體
多巴胺脫羧酶抗體
防御素β1/Defensin β1抗體
DLX4抗體
DTX1抗體
絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體