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有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)基需要的條件
點擊次數(shù)：1553 發(fā)布時間：2014-8-13
有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)基需要的條件
無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是的，從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)基的條件并不像想象中那么直截了當。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。
切記，細胞培養(yǎng)基的儲存條件是2-8攝氏度。如果細胞培養(yǎng)基不小心被凍，您應該融化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒有沉淀產(chǎn)生，培養(yǎng)基可以正常使用，如果出現(xiàn)沉淀，只能丟棄這些培養(yǎng)基。
貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基，可能在放置幾天后顏色變紫。這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時，碳酸氫納導致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口，在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15分鐘，來校正溶液的pH值(確定松開瓶口以保證氣體交換)。
當在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。血清蛋白會結(jié)合和滅活一些抗生素。在無血清培養(yǎng)條件下，抗生素不被滅活，可能對于細胞達到毒性水平。
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
總之，大部分添加物和試劑zui多可以凍融3次，如果次數(shù)更多都會在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，將會影響它的性能。
100克 Bile powder of cow 培養(yǎng)基牛膽汁粉 BR，40%
100克 Bile powder of pig 豬膽汁粉 BR
250克 OX Bile dihydrate purified 脫氫牛膽粉 BR
250克 Beef extract powder 小牛浸膏粉 BR
500克 Meat extracts beef 牛肉膏 BR
250克 Yeast extract powder 酵母粉 BR
500克
500克 Yeast extract 酵母浸膏 BR
25克 Bile salt No. 3 3號膽鹽 BR，90%
25克 Bile salt No. 培養(yǎng)基5 5號膽鹽 BR，70%
25克 Bile salt No.7 7號膽鹽 BR
25克 Bile salt from sheep 羊膽鹽 BR
25克 Bile salt from ox 牛膽鹽 BR，60%
1公斤
25克 Bile salt from pig 豬膽鹽 BR，65%
1公斤
25克 Bile salt from poultry 禽膽鹽 BR
250克 Casein acid hydrolysate 酸水解酪蛋白 BR
1公斤
100克 Casamino acid 培養(yǎng)基酪蛋白水解物 BR
500克
250克 Casein Hydrolysate 酶水解酪蛋白 BR
1公斤