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蘇木精-伊紅染色液
最近更新時間:2013-6-19
提 供 商:上海研生實業(yè)有限公司資料大小:102.5KB
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染色原理:
HE染色法,即是蘇木精-伊紅染色法。石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。
易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)分別稱為嗜堿性和嗜酸性;組織內(nèi)的蛋白質(zhì)構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細胞核的染色質(zhì)、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時,原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。
去氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中稱藍色,所以細胞核被染成藍色。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結(jié)合使胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明對比。伊紅是細胞漿的良好染料。
由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。
一般的組織變化和組織產(chǎn)物都可以通過這一染色法顯示出來,是形態(tài)學zui常用的染色方法。直到目前為止,病理組織學的基本知識,絕大多數(shù)都是從觀察HE染色標本中得來,在質(zhì)量較佳的HE染色切片上,各種組織或細胞的一般形態(tài)結(jié)特點都可以觀察到。
臨床應(yīng)用:用于生物組織細胞標本的切片或涂片的細胞核和細胞漿形態(tài)觀察前的染色。
適用范圍:適宜組織石蠟切片、冰凍切片、火棉膠切片、樹脂切片、細胞涂片等染色。
結(jié)果參考:細胞核呈藍色,細胞漿呈粉紅色至紅色。