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支原體的培養(yǎng)技巧
點(diǎn)擊次數(shù)：932 發(fā)布時(shí)間：2016-4-14
支原體（霉形體）的培養(yǎng)技巧支原體是介于病毒與細(xì)菌之間的一類微生物，在自然界廣泛存在，使人和多種動(dòng)物、植物害病。
它缺乏細(xì)胞壁而不同于細(xì)菌，能在無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)繁殖，并含有RNA和DNA而有別于病毒。支原體以二分裂方式繁殖，基本形態(tài)為圓形、絲狀形，后者易形成分枝狀菌絲，因而得名支原體。其大小介于病毒和細(xì)菌之間，zui小直徑125-250nm，可通過(guò)濾器?；蚪M小只5×108道爾頓，是已知能自行復(fù)制繁殖的原核生物中zui小的，因而生物合成能力低，體外培養(yǎng)時(shí)需要富含營(yíng)養(yǎng)，如血清、酵母浸液、核酸等復(fù)雜成分的培養(yǎng)基才能生長(zhǎng)。它生長(zhǎng)緩慢，倍增時(shí)間1-6小時(shí)，zui長(zhǎng)需三周才形成菌落。菌落中心長(zhǎng)入瓊脂內(nèi)部形成中央較密的核，從上方觀察可見“煎蛋樣”的特殊菌落，因?yàn)榫浜苄⌒柙诘捅剁R下才能看見。Mp從發(fā)酵葡萄糖取得生長(zhǎng)所需能量。Uu則是通過(guò)水解尿素獲得能量。支原體對(duì)抑制細(xì)胞壁合成的青霉類抗生素不敏感，對(duì)抑制蛋白質(zhì)合成的抗生素如四環(huán)素和大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的紅霉素等敏感。
一般培養(yǎng)比較多的是肺炎支原體（MP），解脲脲原體(UU）是耐酸不耐堿的，UU培養(yǎng)的原理是在于其菌體中含有脲酶，而UU培養(yǎng)基中含有尿素，UU的生長(zhǎng)需要其本身的脲酶分解尿素益提供其自身生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，UU培養(yǎng)基中含有指示劑酚紅，由于尿素被分解釋放出氨從而使培養(yǎng)基變堿而使培養(yǎng)基由黃變紅，但是這種紅是一種清亮的紅色，透明澄清無(wú)渾濁，UU其適宜的PH值為6.2-6.5，由于尿素分解產(chǎn)氨是PH上升，UU在PH值大于7的條件下會(huì)迅速死亡，因此，在培養(yǎng)時(shí)要隨時(shí)觀察其液體培養(yǎng)基的PH值，一旦看到培養(yǎng)基變紅，要立即取出，以防培養(yǎng)基PH上升導(dǎo)致UU死亡，一般UU需要在培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)是活力zui強(qiáng)的時(shí)候（培養(yǎng)基呈橙紅色變化）。一般UU生長(zhǎng)需要24小時(shí)。