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尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
點擊次數(shù)：902 發(fā)布時間：2016-6-1
用途：
用于鑒別腸道菌尿素酶試驗 (GB4789.4－2010，《中華人民共和國藥典》2010年版，SN0170-92和GB13091-91，ISO標準)。
原理：
蛋白胨提供碳源和氮源；氯化鈉維持均衡的滲透壓；磷酸二氫鉀是緩沖劑；具有尿素酶的細菌分解培養(yǎng)基中的尿素，產(chǎn)生大量的氨，使培養(yǎng)呈堿性，酚紅指示劑在pH6.8時呈黃色，pH8.1呈粉紅色；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
配方（每升）：
蛋白胨 1g
氯化鈉 5g
葡萄糖 1g
磷酸二氫鉀 2g
酚紅 0.012g
瓊脂 12g
zui終pH7.2±0.2
使用方法：
1、 稱取本品21g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至*溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，待冷卻至50—55℃，每200mL培養(yǎng)基加入經(jīng)過濾除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL，尿素的zui終濃度為2%。分裝無菌試管，制成斜面。
2、 挑取待檢菌的新鮮純培養(yǎng)物，濃密地涂布在尿素瓊脂斜面上，置36±1℃培養(yǎng)24h。
3、 于2—4h及24h各觀察一次結(jié)果。培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色時為陽性反應(yīng)，顏色不變者為陰性反應(yīng)。如為陰性可繼續(xù)培養(yǎng)觀察至4d。
質(zhì)量控制：
質(zhì)控菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)24h結(jié)果如下 ：
菌 名 菌 號 生長狀況 培養(yǎng)特征
普通變形桿菌 HK7131 良好 培養(yǎng)基變紅色
大腸埃希氏菌 ATCC25922 良好 培養(yǎng)基不變色
貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格：250g