Encapsula NanoSciences是一家專業(yè)公司，致力于為學(xué)術(shù)和工業(yè)領(lǐng)域的客戶和合作伙伴提供脂質(zhì)體研究，開發(fā)和制造專業(yè)知識，生產(chǎn)脂質(zhì)納米粒子，也稱為脂質(zhì)體。Encapsula常規(guī)提供藥物包封脂質(zhì)體的定制實(shí)驗(yàn)室規(guī)模脂質(zhì)體制劑，例如Clodrosome®（氯膦酸鹽脂質(zhì)體），Encapsome®（用于氯膦酸鹽脂質(zhì)體的純對照脂質(zhì)體），Doxosome™（多柔比星脂質(zhì)體），Immunosome™（用于抗體的反應(yīng)性脂質(zhì)體，蛋白質(zhì)）結(jié)合），Immunodox™（抗體的反應(yīng)性脂質(zhì)體，含有多柔比星的蛋白質(zhì)結(jié)合物），Immunogene™（抗體的反應(yīng)性脂質(zhì)體，含有遺傳物質(zhì)的蛋白質(zhì)結(jié)合物），Immunofluor™（抗體的反應(yīng)性脂質(zhì)體，包含用于追蹤的熒光分子的蛋白質(zhì)綴合物），Genesome TM（脂質(zhì)體DNA和RNA），F(xiàn)luoroliposome TM（熒光脂質(zhì)體），Atpsome TM（ATP脂質(zhì)體），Cellsome TM（普通脂質(zhì)體作為人工細(xì)胞模型）和Cosmesome TM（用于皮膚病學(xué)的脂質(zhì)體） ）對大學(xué)和工業(yè)研究實(shí)驗(yàn)室的客戶。Encapsula NanoSciences近還推出了兩種口服脂質(zhì)體產(chǎn)品系列; 適用于寵物的NanoLife Nutra和適用于人類的NanoLife Tonics。

encapsula IMS-2011說明書

表面活性脂質(zhì)體（Immunosome®）

有許多化學(xué)物質(zhì)可用于將抗體和其他反應(yīng)性分子綴合到脂質(zhì)體表面。表面反應(yīng)性脂質(zhì)體可以與抗體的N-末端或C-末端綴合。它們可以與硫醇化抗體或Fab'片段上的游離硫綴合。

表面活性脂質(zhì)體（Immunosome®）

Immunosome®-Folate（聚乙二醇化）

SKU＃IMS-2011

描述

在過去的五十年中，已經(jīng)使用各種類型的化學(xué)物質(zhì)將諸如抗體，肽，蛋白質(zhì)或其他反應(yīng)性配體的分子綴合到脂質(zhì)體的表面。通常，綴合可以通過N-末端，C-末端或可用的硫（例如 Fab'級分或硫醇化抗體）實(shí)現(xiàn)。并非所有化學(xué)物質(zhì)具有相同的產(chǎn)率和綴合效率，并且通常再生生物相容性批次可能是一個挑戰(zhàn)。

葉酸結(jié)合蛋白（FBP）是一種內(nèi)源蛋白，對葉酸顯示出非常高的親和力?？梢酝ㄟ^FBP標(biāo)記抗體，并且可以通過脂質(zhì)體表面上的FBP和葉酸脂質(zhì)之間的非共價和高親和力相互作用形成免疫脂質(zhì)體。在該方法中，已經(jīng)通過硫醚鍵與FBP共價連接的抗體與葉酸衍生物脂質(zhì)體綴合。具有相對低的分子量（MW~40kDa）和單一結(jié)合位點(diǎn)可防止脂質(zhì)體交聯(lián)。

Immunosome®-Folate是PEG化產(chǎn)物。對于適用于其他類型的綴合方法的其他反應(yīng)性（PEG化和非PEG化產(chǎn)物）Immunosome®產(chǎn)品，

配方信息

Immunosome®-Folate（聚乙二醇化）

脂質(zhì)成分	濃度（mg / ml）	濃度（mM）	摩爾比百分比
總	15.86毫克/毫升	21.55 mM	100
氫化大豆PC	9.58	12.22	57
膽固醇	3.19	8.25	38
DSPE-PEG（2000）	2.7	0.96	4.5
DSPE-PEG（2000）-Folate	0.39	0.12	0.5

共軛議定書

材料和設(shè)備

為了將您的抗體或FBP標(biāo)記的蛋白與Immunosome®-Folate脂質(zhì)體結(jié)合，您需要：

1. 建議使用實(shí)驗(yàn)室渦旋混合器。
2. 透析需要實(shí)驗(yàn)室磁力攪拌器。
3. Float-A-Lyzer®  具有適當(dāng)?shù)腗WCO，可輕松從游離和非共軛蛋白質(zhì)/肽/配體中清除脂質(zhì)體偶聯(lián)配體。您需要確保MWCO低于1,000,000道爾頓。在1,000,000道爾頓時，透析膜上的孔徑接近100 nm，因此您的脂質(zhì)體可以透析出來。你不能盲目使用透析盒。在使用旋轉(zhuǎn)柱或透析盒之前，請先了解該技術(shù)。如果您沒有使用正確的MWCO，您可能會失去整個準(zhǔn)備工作。對于該協(xié)議，我們建議MWCO為300,000道爾頓。

制備方法

1. Immunosome®-Folate中的總脂質(zhì)濃度為21.55 mM。脂質(zhì)體中0.5％mol的脂質(zhì)含有PEG-葉酸基團(tuán)，并且其中僅一半暴露于脂質(zhì)體的外部，其等于0.053mM的反應(yīng)性可綴合脂質(zhì)。對于2ml體積的脂質(zhì)體，這等于1.08×10 -7 mol，對于5ml體積的脂質(zhì)體，這等于2.69×10 -7mol的PEG-葉酸。 加入1:20摩爾比的用FBP標(biāo)記的抗體與PEG-葉酸脂質(zhì)。
2. 我將Immunosome®-Folate與抗體-FBP在室溫下孵育1小時。
3. 通過透析去除未綴合的抗體，蛋白質(zhì)，肽或配體。我們更喜歡透析以確定排除柱的大小。透析是一個慢得多的過程，但是從非偶聯(lián)蛋白質(zhì)/肽/配體中清除制劑后，免疫脂質(zhì)體的損失小。旋轉(zhuǎn)柱速度非?？?，但旋轉(zhuǎn)柱上的脂質(zhì)體很容易丟失50％以上。我們建議使用Spectrum Labs的Float-A-Lyzer®透析盒。您需要根據(jù)蛋白質(zhì)，配體，抗體或抗體片段的MW選擇具有適當(dāng)MWCO的盒式磁帶。 注意：如果您決定使用透析盒，則需要確保MWCO低于1,000,000道爾頓。在1,000,000道爾頓時，透析膜上的孔徑接近100 nm，因此您的脂質(zhì)體可以透析出來。您不能盲目使用透析盒和旋轉(zhuǎn)柱。它們有各種尺寸，您需要明智地選擇正確的尺寸。將免疫脂質(zhì)體溶液在pH7.4的1升PBS中透析8小時。用新鮮的1升PBS更換透析緩沖液，再透析8小時。完成此步驟后，即可使用已清理過的免疫脂質(zhì)體。如果您沒有使用正確的MWCO，您可能會失去整個準(zhǔn)備工作。

脂質(zhì)體粒子計算器

免疫體是單層脂質(zhì)體，大小為100nm。脂質(zhì)體的摩爾濃度為10mM。通過具有 脂質(zhì)體直徑（nm）和脂質(zhì)濃度（μM），可以計算一個脂質(zhì)體中脂質(zhì)的總數(shù)和1毫升脂質(zhì)體溶液中脂質(zhì)體的數(shù)量。要使用計算器，

技術(shù)說明

• 請記住，主要用于表面含有葉酸的脂質(zhì)體用于靶向細(xì)胞上的葉酸受體。使用用FBP標(biāo)記的抗體/蛋白質(zhì)或配體制備免疫脂質(zhì)體是非常適合的應(yīng)用。
• 由于在低pH下葉酸和FBP之間的親和力降低，免疫脂質(zhì)體可在暴露于內(nèi)體區(qū)室的低pH環(huán)境后通過內(nèi)吞作用而內(nèi)化后解體。通過允許將內(nèi)化脂質(zhì)體分選到合適的亞細(xì)胞區(qū)室和/或促進(jìn)藥物分子從脂質(zhì)體的細(xì)胞內(nèi)釋放，這種內(nèi)化觸發(fā)的解偶聯(lián)可能有益于在細(xì)胞水平上遞送脂質(zhì)體藥物。
• 可以使用尺寸排阻旋轉(zhuǎn)柱如Sepharose®CL-4B代替Float-A-Lyzer®透析盒。然而，在清理過程中會有非常大量的脂質(zhì)體粘附在柱子上，因此我們強(qiáng)烈建議使用透析而不是尺寸*的珠子。
• 如果您使用疏水的配體或肽，建議將其溶解在DMSO或DMF中，然后將緩沖液加入其中。建議溶液中不要使用超過5％體積的DMSO或DMF。DMF和DMSO均與脂質(zhì)體相容，并且它們也可與水混溶。其他有機(jī)溶劑如乙醇和氯方與脂質(zhì)體不相容并會導(dǎo)致脂質(zhì)體溶解。如果您終使用DMSO或DMF，那么在完成綴合反應(yīng)后，您需要從脂質(zhì)體中去除DMSO和DMF。為此，您需要使用由REGENERATED CELLULOSE MEMBRANE制成的透析盒。注意：并非所有膜都與DMF和DMSO兼容。我們建議使用Slide-A-Lyzer™MINI透析裝置MWCO為2K，由ThermoFisher生產(chǎn)的再生纖維素膜制成。除去DMSO或DMF后，您可以使用Float-A-Lyzer®透析裝置進(jìn)行清潔制劑的后步驟。
• 脂質(zhì)體應(yīng)保持在4°C，切勿冷凍。

出現(xiàn)

Immunosome®-Folate是一種由納米尺寸單層脂質(zhì)體制成的白色半透明液體。通常由于脂質(zhì)體的小尺寸，在小瓶的底部不會發(fā)生沉降。將脂質(zhì)體包裝在琥珀色小瓶中。 

訂購/運(yùn)輸信息

• 所有基于脂質(zhì)體的制劑在隔熱包裝中使用隔夜運(yùn)輸或快遞運(yùn)輸在4°C的藍(lán)色冰上運(yùn)輸。
• 脂質(zhì)體不應(yīng)該被冷凍。在脂質(zhì)膜中形成的結(jié)晶冰可破壞膜，改變脂質(zhì)體的大小并導(dǎo)致包封的藥物泄漏。液體形式的脂質(zhì)體應(yīng)始終保存在冰箱中。
• 從美利堅(jiān)合眾國境外訂購的客戶負(fù)責(zé)其政府進(jìn)口稅和海關(guān)文書工作。Encapsula NanoSciences不對美國以外國家的進(jìn)口費(fèi)負(fù)責(zé)。
• 我們強(qiáng)烈鼓勵日本，韓國，中國臺灣和中國的客戶通過經(jīng)銷商訂購。如果直接通過我們訂購，這些國家的嚴(yán)格通關(guān)規(guī)定將導(dǎo)致這些易腐配方的定制清關(guān)延遲。經(jīng)銷商可以輕松清關(guān)海關(guān)包裹。要查看經(jīng)銷商列表，請單擊此處。
• 從澳大利亞的大學(xué)和研究機(jī)構(gòu)訂購的客戶應(yīng)該記住，脂質(zhì)體配方是由合成材料制成的，配方不需要“允許進(jìn)口檢疫材料”。脂質(zhì)體不是生物制品。
• 如果您希望您的學(xué)院的FedEx或DHL帳戶收取運(yùn)費(fèi)，請?jiān)谟嗁彆r提供帳號。
• Encapsula NanoSciences無法控制因惡劣天氣或清關(guān)延誤造成的延誤。確認(rèn)訂單后，您將收到FedEx或DHL跟蹤號碼。提前聯(lián)系FedEx或DHL，確保海關(guān)的文書工作按時完成。

儲存和保質(zhì)期

存儲

Immunosome®產(chǎn)品應(yīng)始終在4°C??的黑暗中儲存，除非在動物給藥前短時間內(nèi)置于室溫。不要凍結(jié)。如果懸浮液被冷凍，則包封的藥物可以從脂質(zhì)體中釋放，從而限制其有效性。此外，脂質(zhì)體的大小也會在冷凍和解凍時發(fā)生變化。

保質(zhì)期

Immunosome®-Folate每天制作。裝運(yùn)的批次是在同一天生產(chǎn)的。建議在生產(chǎn)日期后4個月內(nèi)使用產(chǎn)品。