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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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lifescienceproduction T-Store的技術(shù)信息
概述
T-STORE®（組織儲存）是一種無菌、化學(xué)成分明確且經(jīng)過優(yōu)化的培養(yǎng)基，開發(fā)用于為哺乳動(dòng)物組織樣本和細(xì)胞提供穩(wěn)定的儲存和運(yùn)輸環(huán)境。該產(chǎn)品設(shè)計(jì)用于維持組織樣本的完整性，從而減少壞死和細(xì)胞凋亡。
- TORE®采用穩(wěn)健的緩沖系統(tǒng)，允許在較寬的溫度范圍（+ 2 ℃至
+ 37 ℃）。此外，它被設(shè)計(jì)為與人血清和間質(zhì)液等滲、等滲和等離子，根據(jù)需要?jiǎng)?chuàng)造一個(gè)適合維持離體組織和細(xì)胞數(shù)小時(shí)或數(shù)天的穩(wěn)態(tài)環(huán)境。
使用T-STORE®的優(yōu)勢
- T-STORE®是一種“即用型”運(yùn)輸和儲存介質(zhì)，適用于采集各種細(xì)胞和組織。
- T-STORE®為高度時(shí)間關(guān)鍵工藝提供了靈活性。
- T-STORE®可在亞常溫（非冷凍）和/或常溫溫度下使用。
- T-STORE®可在 + 2 °C至 + 37 °C溫度范圍內(nèi)提供穩(wěn)定的pH緩沖(pH 7.20-7.45)。
- T-STORE®可用于需氧或厭氧條件。
- T-STORE®無異種，即不含血清和動(dòng)物/人蛋白。
- 內(nèi)毒素水平符合EU標(biāo)準(zhǔn)(≤1.0 EU/mL)，T-STORE®無溶劑，即不含DMSO。
應(yīng)用程序
分析前組織樣本的儲存和運(yùn)輸
進(jìn)一步分析前，分離/分離或富集后細(xì)胞的儲存組織
T-STORE®模擬間質(zhì)液的基本組成，意味著在儲存和運(yùn)輸過程中維持組織的酸堿(pH)平衡，允許組織在清除后72小時(shí)內(nèi)成功使用。在T-STORE®中儲存可使組織樣本保留遺傳和組織學(xué)特征長達(dá)72小時(shí)。
雖然其他組織保存液具有“組織特異性”，但T-STORE®可用于各種類型的正常和惡性組織，是儲存和運(yùn)輸“新鮮”樣本進(jìn)行進(jìn)一步處理的理想選擇。
表1. T-STORE®用于組織樣本的受益
采集階段 | 現(xiàn)行規(guī)范 | T-STORE®方案 |
采集和立即保存 | 活檢送去時(shí)干燥/浸泡在鹽水中/用紗布包裹/福爾馬林固定。 | 活檢標(biāo)本可以簡單地浸入 + 2 °C至 + 8 °C所需體積的T-STORE®中。 |
運(yùn)輸 | 速凍(SF)、福爾馬林固定(FFPE)處理或作為新鮮組織發(fā)送。運(yùn)輸時(shí)間長可能會降解新鮮組織。 | 處理前，組織可在0-4 ℃或室溫(RT)下置于T-STORE®冰上保存長達(dá)72小時(shí)。 |
處理 | 可立即使用新鮮組織，否則僅限于SF或FFPE組織樣本 | T-STORE®適用于廣泛的下游分析。 |
分析 | 由于處理限制，分析選擇受到限制。 | T-STORE®適用于各種組織和分析選項(xiàng)。 |
結(jié)果 | 組織樣本內(nèi)分子特征可能發(fā)生變化。 | T-STORE®保留了組織的形態(tài)和分子結(jié)構(gòu)。 |
細(xì)胞支架、儲存和運(yùn)輸
T-STORE®提供了理想的液體成分，可保持離體人體細(xì)胞的酸堿平衡和完整性。該制劑的*之處促進(jìn)了三磷酸腺苷(ATP)生成中的線粒體代謝。
T-STORE®適用于無數(shù)干細(xì)胞和外周血細(xì)胞類型，無需添加破壞性化合物，可‘冷’（低溫）、亞常溫（+ 15 ℃～
+ 25 ℃）和常溫條件下。該產(chǎn)品也有可能用于細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器。
使用T-STORE®
組織樣本的獲取
T-STORE®以純品形式提供，無需進(jìn)一步稀釋。其他抗生素制劑可用，包括兩性霉素B和氯霉素以及兩性霉素B和納米霉素。作為生產(chǎn)商，我們還能夠根據(jù)客戶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為T-STORE®提供定制添加劑。產(chǎn)品介紹請參見下表2。
切除后，組織樣本應(yīng)立即*浸沒在T-STORE中。所需的T-STORE®體積應(yīng)由用戶確定，如樣本量和
下游應(yīng)用程序可能會影響需求。作為進(jìn)一步優(yōu)化的起點(diǎn)，我們建議使用無頂空的無菌防漏容器*浸沒在T-STORE®中。建議使用過量的T-STORE®，以確保成功儲存。
使用T-STORE®在室溫下儲存細(xì)胞
儲存前，應(yīng)在推薦條件下培養(yǎng)細(xì)胞系。
- 分離生長活躍的貼壁細(xì)胞或直接收獲懸浮細(xì)胞，計(jì)算細(xì)胞數(shù)量和活力。
- 室溫下以180 xg沉淀細(xì)胞5 min，棄去上清液。將沉淀物重懸于3 mL T-STORE®中，并按照上文所述進(jìn)行重懸。棄去上清液。
- 將細(xì)胞團(tuán)塊重懸于2 mL T-STORE中，并轉(zhuǎn)移至2 mL冷凍管（或等同產(chǎn)品）中。
- 試管可在室溫下避光儲存長達(dá)72h。穩(wěn)健的細(xì)胞類型可儲存長達(dá)96h。
- 為回收細(xì)胞，在轉(zhuǎn)移至含有*生長培養(yǎng)基的適當(dāng)容器中之前，應(yīng)輕輕重懸細(xì)胞（回收前無需移除T-STORE®）。在最佳條件下（例如，在37 ℃、5%CO2的加濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞）。
- 應(yīng)在48h內(nèi)觀察到細(xì)胞*恢復(fù)。
作為質(zhì)量控制過程的一部分，每批T-STORE®在放行前均進(jìn)行了功能性檢測。功能測試使用HEK細(xì)胞和上述方案。顯示的數(shù)據(jù)已從14個(gè)批次中整理，并顯示在T-STORE中儲存72h后，細(xì)胞數(shù)量保持在好活力和回收率。
規(guī)格
室溫下在工作臺上放置96小時(shí)后，儲存在T-STORE®（C和C）中的HEK細(xì)胞保持粘附，并在儲存前保持與細(xì)胞相似的形態(tài)（上圖）。儲存在DMEM/HEPES中的細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，96小時(shí)后失去粘附性（B和B）。對照細(xì)胞（A和A）在37 ℃、5%CO2的*DMEM中培養(yǎng)，在96小時(shí)內(nèi)過度生長。圖像來自兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)（大寫和小寫標(biāo)簽）。原始放大率100X。
T-STORE®是一種無菌即用型溶液。T-STORE®可與抗生素聯(lián)合使用：兩性霉素B和氯霉素或兩性霉素B和納米霉素。
表2. T-STORE®有以下規(guī)格。
產(chǎn)品代碼 | 產(chǎn)品描述 | 包裝規(guī)格 |
T-三羥甲基氨基甲烷 | T-STORE®組織儲存和運(yùn)輸培養(yǎng)基 | 50 mL、125 mL、 500 mL、1 L |
T-STORE-B-AA | 含抗生素的T-STORE®組織儲存和運(yùn)輸培養(yǎng)基（兩性霉素B和氯霉素） | 100mL |
T-STORE-B-AN | T-STORE®組織儲存和運(yùn)輸培養(yǎng)基 含抗生素（兩性霉素B和納米霉素） | 100mL |
T-STORE-X-CUS | T-STORE®組織儲存和運(yùn)輸培養(yǎng)基 含符合客戶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的定制添加劑 | 可應(yīng)要求提供 |
注：產(chǎn)品代碼中的“X”表示包裝規(guī)格。請說明訂購時(shí)所需的包裝規(guī)格?？股貪舛龋簝尚悦顾谺(5µg/mL)、氯霉素(0.1 mg/mL)、納米霉素(1X)。
有效期
在以下條件下儲存時(shí)，不含抗生素的T-STORE®自生產(chǎn)日期起的有效期為10個(gè)月
+ 2-8 ℃下避光儲存。加入抗生素的T-STORE®在 + 2-8 °C避光條件下儲存時(shí)，有效期為自生產(chǎn)日期起1個(gè)月。
儲存條件
推薦儲存溫度為 + 2 °C至 + 8 °C。T-STORE®避光保存。產(chǎn)品在環(huán)境溫度下運(yùn)輸。
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