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菌落計數(shù)器的計數(shù)方法
菌落計數(shù)器由計數(shù)器、探筆、計數(shù)池等部分組成,計數(shù)器采用CMOS集成電路精心設(shè)計,LED數(shù)碼管顯示,字高13mm,清晰明亮,配合探筆,計數(shù)靈敏準(zhǔn)確,菌落對比清楚。便于觀察??蓮V泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗。那么菌落計數(shù)器都是怎樣進(jìn)行計數(shù)的呢?上海巴玖來為您詳細(xì)講解菌落計數(shù)器的計數(shù)方法。
1.計數(shù)器測定法
即用血細(xì)胞計數(shù)器進(jìn)行計數(shù)。取一定體積的樣品細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計數(shù)器的計數(shù)室內(nèi),用顯微鏡觀察計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的(O.1mm3),因而根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細(xì)菌數(shù),可計算樣品中的含菌數(shù)。本法簡便易行,可立即得出結(jié)果(本法不僅適于細(xì)菌計數(shù),也適用于酵母菌及霉菌孢子計數(shù))。
2.電子計數(shù)器計數(shù)法
電子計數(shù)器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個細(xì)胞,當(dāng)一個細(xì)胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈沖,自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結(jié)果較準(zhǔn)確,但它只識別顆粒大小,而不能區(qū)分是否為細(xì)菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3.活細(xì)胞計數(shù)法
常用的有平板菌落計數(shù)法,是根據(jù)每個活的細(xì)菌能長出一個菌落的原理設(shè)計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進(jìn)行平板,根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù),可算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數(shù)的方法,也是目前上許多國家所采用的方法。使用該法應(yīng)注意:①一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計數(shù),過多或過少均不準(zhǔn)確;②為了防止菌落蔓延,影響計數(shù),可在培養(yǎng)基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。
廣泛應(yīng)用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細(xì)菌檢驗,是較為常用的活菌計數(shù)法。
4.比濁法
比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細(xì)菌的數(shù)量。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細(xì)菌的懸浮液,得出相對的細(xì)菌數(shù)目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。
5.測定細(xì)胞重量法
此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進(jìn)行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6.測定細(xì)胞總氮量或總碳量
氮、碳是細(xì)胞的主要成分,含量較穩(wěn)定,測定氮、碳的含量可以推知細(xì)胞的質(zhì)量。此法適于細(xì)胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱CCU)
這種方法通常用于很小,用一般的比濁法無法計數(shù)的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養(yǎng)物是*透明的,呈現(xiàn)為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數(shù),由于支原體固體培養(yǎng)很困難,用cfu法也不容易計數(shù),因此需要用特殊的計數(shù)方法,即CCU法。它是以微生物在培養(yǎng)基中的代謝活力為指標(biāo),來計數(shù)微生物的相對含量的。
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