您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品分類品牌分類
-
混勻儀|混合器 氣體發(fā)生器 分光測(cè)色計(jì) 勻漿機(jī) 研磨機(jī) 超凈工作臺(tái) 洗板機(jī) 高低溫試驗(yàn)箱 恒溫金屬浴 電阻爐 溶劑過濾器 漩渦混合儀|旋渦混勻儀 均質(zhì)器 水槽 恒溫水槽 手套 培養(yǎng)板 生物安全柜 天平 滴定管 瓶口分液器 光澤儀 錐入度儀 濁度計(jì) 分析儀 冷藏保存箱 色差儀 超純水機(jī) 預(yù)制冷槽 油浴槽 冷卻水循環(huán)裝置 溶媒回收裝置 恒溫水浴槽 液氮罐 馬弗爐 酶標(biāo)儀 培養(yǎng)箱 電泳儀 潔凈工作臺(tái) 干燥箱 磁力攪拌器 滅菌器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 低溫冰箱 防爆冰箱 離心機(jī) 振蕩器 移液器 真空泵
原位PCR分類
原位 PCR 技術(shù)(In situ PCR，Is PCR )是 Hasse 等人于 1990 年建立的技術(shù)，即在組織細(xì) 胞里進(jìn)行 PCR 反應(yīng)，當(dāng)時(shí)稱為“細(xì)胞內(nèi) PCR"(in cell PCR)。它結(jié)合了具有細(xì)胞定位能力的 原位雜交技術(shù)和高度特異敏感性的 PCR 技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，能檢測(cè)出細(xì)胞內(nèi)單拷貝及低拷貝的靶 DNA 或 RNA。
該方法就是利用完整的細(xì)胞作為一個(gè)微小的反應(yīng)體系來擴(kuò)增細(xì)胞內(nèi)的目的片 段，在不破壞細(xì)胞的前提下，利用一些特定的檢測(cè)手段來檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的擴(kuò)增產(chǎn)物。與原位雜 交相比，原位 PCR 技術(shù)大大提高了檢測(cè)的靈敏度。原位技術(shù)既可以分辯鑒定帶有靶序列的 細(xì)胞，又可以標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置，對(duì)有效檢測(cè)各種病原菌和從分子及細(xì)胞水平上研 究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床轉(zhuǎn)歸過程具有重大的實(shí)用價(jià)值。
原位 PCR 技術(shù)作為一種病原體的檢測(cè)方法，其標(biāo)記物的類型可分為兩種:非放射性標(biāo) 記法和放射性標(biāo)記法。非放射性標(biāo)記法包括如、生物素、過氧化物酶等，后者放射性 標(biāo)記法多采用放射性同位素 H3h 和 P32 等。
根據(jù)標(biāo)記物摻入方法的不同，原位 PCR 方法分為兩大類:即在反應(yīng)體系中使用標(biāo)記的 單核苷酸或引物的直接法原位 PCR(direct in situ PCR);所用引物和單核苷酸都不帶任何標(biāo)記 物，待反應(yīng)結(jié)束后再用原位雜交技術(shù)檢測(cè)特異性擴(kuò)增片段產(chǎn)物的間接法原位 PCR(indirect in situ PCR)。現(xiàn)在臨床上使用最多的是間接法原位 PCR，相對(duì)于直接法原位 PCR，它的特異 性更高。
另外還有一種叫做原位反轉(zhuǎn)錄 PCR 的原位擴(kuò)增方法是指在進(jìn)行 PCR 之前首*行 反轉(zhuǎn)錄過程(RT)，將反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物作為模板用于擴(kuò)增，這個(gè)過程叫做原位反轉(zhuǎn)錄 PCR(In situ reverse transcription PCR，簡(jiǎn)稱原位 RT-PCR)。近年出現(xiàn)的原位環(huán)式等溫?cái)U(kuò)增，即在 Is PCR 原理基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，穿透處理?xiàng)l件溫和，細(xì)胞不易破碎，設(shè)計(jì)的環(huán)狀引物使擴(kuò)增產(chǎn) 物分子量大，不易擴(kuò)散，擴(kuò)增溫度低且恒定，不使用 PCR 儀，細(xì)胞損失率大大降低。