詳細(xì)介紹
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 趨化素樣因子超家族成員3抗體 |
英文名稱 | CKLFH3 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
孢磺啶(MUGal肉湯凍干配套試劑) 規(guī)格: 0.5mg/支x10 用途: 每支添加于100ml(022051)中配成MUGal肉湯。
察氏培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于培養(yǎng)能以硝酸鹽作為氮源的真菌和細(xì)菌,及和霉等霉菌的分離培養(yǎng)和形態(tài)鑒別
馬鈴薯瓊脂 規(guī)格: 100g 用途: 用于霉菌的培養(yǎng)
小鼠腎小管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
LIM培養(yǎng)基/賴氨酸吲哚動(dòng)力培養(yǎng)基/賴氨酸靛基質(zhì)動(dòng)力培養(yǎng)基/LIM Medium用于鏈球菌的分離培養(yǎng);細(xì)菌的賴氨酸、吲哚和動(dòng)力復(fù)合生化試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
四硫磺酸鈉亮綠增菌液/四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)/TTB沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人肝細(xì)胞英文名稱:Li-7
Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
內(nèi)分泌腺來(lái)源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)重組蛋白英文名稱:Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)
107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白英文名稱:Recombinant Isitol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)
小鼠食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NBB培養(yǎng)基/NBB瓊脂/啤酒有害細(xì)菌檢測(cè)瓊脂/NBB Agar啤酒中厭氧菌檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
細(xì)菌蛋白胨/Bacto PeptoneBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)ELISA Kit for Six Transmembrane Epithelial Antigen Of The Prostate 2 (STEAP2)規(guī)格:48T/96T
BMP激活素膜結(jié)合抑制因子同源物(BAMBI)ELISA Kit for BMP And Activin Membrane Bound Inhibitor Homolog (BAMBI)規(guī)格:48T/96T
谷酰合成酶(GS)ELISA Kit for Glutamine synthetase (GS)規(guī)格:48T/96T
母系蛋白2(MATN2)ELISA Kit for Matrilin 2 (MATN2)規(guī)格:48T/96T
磷酰肌醇特異性磷酯酶Cγ2(PLCγ2)ELISA Kit for Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylisitol Specific (PLCg2)規(guī)格:48T/96T
補(bǔ)體應(yīng)答基因32(RGC32)ELISA Kit for Response Gene To Complement 32 (RGC32)規(guī)格:48T/96T
無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員4(WNT4)ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4)規(guī)格:48T/96T
含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)ELISA Kit for Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)規(guī)格:48T/96T
活性依賴性神經(jīng)保護(hù)因子(ADNP)ELISA Kit for Activity Dependent Neuroprotector Protein (ADNP)規(guī)格:48T/96T
腫瘤壞死因子配體超家族成員13(TNFSF13)ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 13 (TNFSF13)規(guī)格:48T/96T
Janus激酶2(JAK2)ELISA Kit for Janus Kinase 2 (JAK2)規(guī)格:48T/96T
Smad同源物2(Smad2)ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 2 (Smad2)規(guī)格:48T/96T
趨化素樣因子超家族成員3抗體250mgSephadex G-15 葡聚糖凝膠G-1564-72-241059-79-496T凝血子Ⅴ(F5)HPLC≥98%富含半胱蛋白61檢測(cè)試劑盒20mgADH40732-48-7化學(xué)試劑Maestro蛋白(MRO)2gSephadex G-15 葡聚糖凝膠G-1564-72-2136656-07-096T凝血子Ⅴ(F5)HPLC-SD≥95%副腫瘤性天皰瘡檢測(cè)試劑盒20mgALDH40732-48-7化學(xué)試劑酯酶1(MPPE1)
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200mgSephadex G-15 葡聚糖凝膠G-1593107-08-5142759-74-896T凝血子ⅩⅢ(F13)HPLC≥98%復(fù)制蛋白A檢測(cè)試劑盒10mgALDH258-63-9化學(xué)試劑M-期蛋白10(MPHOSPH10)25mgSephadex G-15 葡聚糖凝膠G-15 進(jìn)口93107-08-5185432-00-296T凝血子ⅩⅢ(F13)HPLC≥97%附睪蛋白4檢測(cè)試劑盒10mgALDH1A358-63-9化學(xué)試劑M-期蛋白9(MPHOSPH9)
25mgSephadex G-15 葡聚糖凝膠G-15 進(jìn)口93107-08-5185432-00-296T凝血子ⅩⅢ(F13)HPLC≥97%附睪蛋白4檢測(cè)試劑盒10mgALDH1A358-63-9化學(xué)試劑M-期蛋白9(MPHOSPH9)125mgSephadex G-15 葡聚糖凝膠G-15 進(jìn)口93107-08-5136565-73-696T凝血子Ⅻ(F12)HPLC≥98%輔酶Q10檢測(cè)試劑盒10mgACC58-63-9化學(xué)試劑M-期蛋白8(MPHOSPH8)
125mgSephadex G-15 葡聚糖凝膠G-15 進(jìn)口93107-08-5136565-73-696T凝血子Ⅻ(F12)HPLC≥98%輔酶Q10檢測(cè)試劑盒10mgACC58-63-9化學(xué)試劑M-期蛋白8(MPHOSPH8)200mgSephadex G-25 葡聚糖凝膠G-2585721-33-124512-63-896T凝血子Ⅻ(F12)HPLC≥98%脯肽酶檢測(cè)試劑盒20mgACC158-63-9化學(xué)試劑M-期蛋白6(MPHOSPH6)