詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 碳酸酐酶13抗體 |
英文名稱 | CA13 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
3黃8羧英文名稱:3 methyl flavones 8 carboxylic acid保存:20℃,避光規(guī)格:100mg跨膜蛋白超家族91一抗
鹽黃哌英文名稱:Flavoxate hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg跨膜蛋白166一抗
鈉英文名稱:Sodium valproate保存:20℃,避光規(guī)格:200mg氧還蛋白結(jié)合蛋白2一抗
楊愈創(chuàng)木(呱西替柳雜質(zhì)A)英文名稱:Salicylic acid and guaiacol ester (guacetisal impurity A)保存:20℃,避光規(guī)格:50mg化神經(jīng)細(xì)胞特異性微管蛋白一抗
呱西替柳英文名稱:Guacetisal保存:20℃,避光規(guī)格:100mg瞬時受體電位離子通道蛋白7一抗(M亞家族)
丹曲林鈉英文名稱:Dantrolene sodium保存:20℃,避光規(guī)格:100mg“冷”蛋白TRPM8一抗
枸櫞鉍雷尼替英文名稱:Ranitidine bismuth citrate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg瞬時受體電位離子通道蛋白3一抗(M亞家族)
馬來羅格列英文名稱:Rosiglitazone maleate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg雌激素反應(yīng)鋅指蛋白一抗
福辛普利鈉雜質(zhì)A(福辛普利拉)英文名稱:Fosipril Sodium impurity A (Phu Simpson Leila)保存:20℃,避光規(guī)格:50mgTWIST蛋白2一抗一抗
海英文名稱:Iohexol保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶一抗
酰哈巴苷英文名稱:Acetyl Harpagide保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1一抗
哈巴苷;哈帕苷; 哈帕甙; 瓜鉤草苷英文名稱:Harpagide; Harpagide; harpagoside; melon hook grass glycosides保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支化結(jié)節(jié)性硬化蛋白一抗
哈巴俄苷英文名稱:Harpagoside保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支化雌激素反應(yīng)指狀蛋白一抗
莫諾苷英文名稱:Mod glycoside保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支跨膜蛋白18一抗
小豆蔻明、豆蔻素、小豆蔻查耳英文名稱:Cardamonin, nutmeg, cardamom chalcone pigment保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支轉(zhuǎn)錄因子E3
山楂;馬斯里英文名稱:Hawthorn acid; Maslinic Acid保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支20號染色體開放閱讀框11一抗
白頭翁皂苷A3;白頭翁皂甙A3英文名稱:Pulsatilla Saponin A3; Pulsatilla Saponin A3保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支細(xì)胞表面糖蛋白Trop2一抗(胰腺癌標(biāo)志物蛋白)
碳酸酐酶13抗體乙酰化組蛋白H4抗體Pemetrexed disodium別名: 分子式: C21H23N5Na2O6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
熱休克蛋白B2抗體cis-Octahydro-isoindole別名: 分子式: C8H15N性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
人類白細(xì)胞抗原B272-Benzylsuccinic acid別名: 分子式: C11H12O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxyla別名: 分子式: C12H14N2O4S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1β2抗體Fluorocytosine別名: 分子式: C4H4FN3O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
HDHD3蛋白抗體N-(2,6-Dimethylphenyl)-2-piperidinecarboxamide別名: 分子式: C14H20N2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
HEATR3蛋白抗體Fenazox別名: 分子式: C15H14NNaO4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
癌增強蛋白抗體Imidazo[1,2-b]pyridazine別名: 分子式: C6H5N3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: