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分光光度法則是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。常用的波長(zhǎng)范圍為：（1）200～400nm的紫外光區(qū),（2）400～760nm的可見(jiàn)光區(qū),（3）2.5～25μm（按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度，所有儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進(jìn)行校正檢定。
簡(jiǎn)單原理
鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400～760nm波長(zhǎng)的光譜,光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅,橙,黃,綠,藍(lán),靛,紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計(jì)的光源. 氫燈（或氘燈）的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185～400 nm波長(zhǎng)的光譜,可作為紫外光光度計(jì)的光源. 物質(zhì)的吸收光譜（1） 如果在光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液,此時(shí)在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現(xiàn)了幾條暗線,即光源發(fā)射光譜中某些波長(zhǎng)的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜. 不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據(jù)吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì). 物質(zhì)的吸收光譜（2） 當(dāng)光線通過(guò)某種物質(zhì)的溶液時(shí),透過(guò)的光的強(qiáng)度減弱.因?yàn)橛幸徊糠止庠谌芤旱谋砻娣瓷浠蚍稚?一部分光被組成此溶液的物質(zhì)所吸收,只有一部分光可透過(guò)溶液. 入射光 = 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透過(guò)光 如果我們用蒸餾水（或組成此溶液的溶劑）作為"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失,則: 入射光 = 吸收光 十 透過(guò)光
結(jié)構(gòu)
分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器、信號(hào)處理器和顯示與存儲(chǔ)系統(tǒng)組成。簡(jiǎn)單原理
分光光度計(jì)計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過(guò)系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源，光源透過(guò)測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
光譜范圍
包括波長(zhǎng)范圍為400~760 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200～400 nm的紫外光區(qū).不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源.技術(shù)參數(shù)：
1、波長(zhǎng)范圍： 190nm～900nm
2、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度：±0.3nm（開(kāi)機(jī)自動(dòng)校準(zhǔn)）
3、波長(zhǎng)重復(fù)性：0.1nm
4、光譜帶寬： TU-1900：2nm
TU-1901：0.1nm、0.2nm、0.5nm、1.0nm、2.0nm、5.0nm
5、雜散光： ≤0.01%T（220nm,NaI； 340nm,NaNo2）
6、光度方式： 透過(guò)率、吸光度、反射率、能量
7、光度范圍： -4.0～4.0Abs
8、光度準(zhǔn)確度：±0.002Abs（0～0.bs）；±0.004Abs（0.5～1.0Abs）；
±0.3%T（0～100%T）
9、光度重復(fù)性：0.001Abs（0～0.bs）；0.002Abs（0.5～1.0Abs）
10、基線平直度：±0.001Abs
11、基線漂移： 0.0004Abs/h（500nm, 0Abs預(yù)熱2小時(shí)后）
12、光度噪聲： ±0.0004Abs
