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產(chǎn)品名稱：Inspire Spark® PrimeRNP Kit
產(chǎn)品貨號：MJ5460
產(chǎn)品規(guī)格：50 rxn（含Solution I 75μL，Solution II 2.5mL）
儲存條件：-80℃（長期），-20℃（解凍后）

技術(shù)參數(shù)：RNP復(fù)合物自遞送系統(tǒng)，支持2000-4000 bp片段敲入

紅榮微再 MJ5460 基因編輯試劑盒 價格優(yōu)勢（Inspire Spark® PrimeRNP Kit）華雅思創(chuàng)現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎咨詢

產(chǎn)品概述

Inspire Spark® PrimeRNP Kit 是專為攻克原代細(xì)胞基因編輯瓶頸設(shè)計的革命性工具。基于自遞送CRISPR/SpCas9系統(tǒng)，無需電轉(zhuǎn)儀即可在 人原代T細(xì)胞、干細(xì)胞及難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系 中實(shí)現(xiàn)85-90%的敲除（KO）/敲入（KI）效率， 解決傳統(tǒng)方法毒性高、效率低的難題。

核心優(yōu)勢：三大技術(shù)突破

1. 終結(jié)電轉(zhuǎn)依賴，解鎖原代細(xì)胞極限
   傳統(tǒng)電轉(zhuǎn)導(dǎo)致原代細(xì)胞死亡率>40%，而 Inspire Spark® 通過 eSpCas9-SgRNA自組裝復(fù)合物（37℃ 5分鐘成核），直接穿透細(xì)胞膜。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：人原代T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)后存活率>95%，編輯效率穩(wěn)定達(dá) 88.2±3.1%（n=15）。

2. 雙高特性：高效率+低脫靶
   對比野生型Cas9， Solution I中優(yōu)化的eSpCas9蛋白 通過帶正電荷結(jié)構(gòu)域增強(qiáng)靶向性，脫靶率降低 4.2倍（全基因組測序驗(yàn)證）。支持多基因同步編輯（≤4基因），KO/KI雙功能效率>85%。

3. AAV輔助大片段敲入標(biāo)準(zhǔn)化
   兼容 AAV donor載體（MOI 2×10?-5×10?），實(shí)現(xiàn)2000-4000 bp定點(diǎn)整合，KI效率 50-80%。案例：TRAC位點(diǎn)CAR構(gòu)建成功率78.3%，遠(yuǎn)超慢病毒方案（<35%）。

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實(shí)驗(yàn)流程（以人原代T細(xì)胞為例）

一、轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物制備

混合1.5μL SgRNA（100μM） + 1.5μL Solution I → 37℃孵育5-10分鐘（形成RNP）。

加50μL Solution II（室溫預(yù)平衡） → 混勻后室溫靜置5分鐘。

二、細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)

細(xì)胞預(yù)處理：激活T細(xì)胞48小時后洗滌，離心去培養(yǎng)基（用OptiMEM/PBS清洗殘留）。

細(xì)胞沉淀重懸于轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物 → 37℃孵育45分鐘。

三、培養(yǎng)與檢測

加600μL含10% FBS + 200U IL-2的T細(xì)胞培養(yǎng)基 → 接種至24孔板（密度2-3×10?/mL）。

培養(yǎng)4-5天后檢測編輯效率。

關(guān)鍵注意事項

應(yīng)用場景 操作要點(diǎn)

AAV輔助KI AAV體積≤5μL：RNP制備階段加入；>5μL：細(xì)胞培養(yǎng)階段加入（MOI: 2×10?-5×10?）

多基因編輯 方案A：混合多靶點(diǎn)RNP；方案B：分步轉(zhuǎn)導(dǎo)（間隔48小時，≤2基因/次）

細(xì)胞狀態(tài) 轉(zhuǎn)導(dǎo)前活性>90%

電轉(zhuǎn)兼容性 Solution I（eSpCas9）可單獨(dú)用于電轉(zhuǎn) → 效率較野生型提升30%

產(chǎn)品名稱：Inspire Spark® PrimeRNP Kit（基因編輯試劑盒）

貨號：MJ5460

規(guī)格：50 rxn

Inspire Spark PrimeRNP Kit基因編輯試劑盒，華雅思創(chuàng)現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎咨詢

紅榮微再 MJ5460 基因編輯試劑盒 價格優(yōu)勢（Inspire Spark® PrimeRNP Kit）華雅思創(chuàng)現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎咨詢