分光光度計是精密儀器，正確安裝、使用及保養(yǎng)對保持儀器良好的性能和保證測試的準(zhǔn)確度具有重要作用。為了保證測試結(jié)果的準(zhǔn)確性及可靠性，新制造、使用中和修理后的分光光度計都應(yīng)定期進(jìn)行檢定。檢定不合格的儀器還要進(jìn)行及時調(diào)整。除此之外，分光光度計的操作步驟都有啥？為了解決使用者的疑惑，更好的保護(hù)分光光度計與實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，本次特別介紹分光光度計，供參考！
分光光度計的檢驗小妙招
1.波長準(zhǔn)確度的檢驗：分光光度計在使用過程中，由于機(jī)械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因，經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象，因而導(dǎo)致儀器靈明度降低，影響測定結(jié)果的精度，需要進(jìn)行檢驗。
檢驗波長準(zhǔn)確度簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值,如果測出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定,則需要進(jìn)行波長調(diào)節(jié)。
2.透射比正確度的檢驗：用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片，可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處，以空氣為參比，分別測量各濾光片的透射比，紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處，以高氯酸溶液為參比，測量其透射比。
3.穩(wěn)定度的檢驗：在零點不受光的條件下，用零點調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點，觀察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處，調(diào)節(jié)零點后，蓋上樣品室蓋(打開光門)，使光電管受光，調(diào)節(jié)透射比為95%(數(shù)顯儀器調(diào)至100%)察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩(wěn)定性。
4.光的檢驗：
可見分光計棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片，以空氣為參比，測量其透射比值，即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。
使用分光光度計的步驟與方法
1.預(yù)熱儀器：為使測定穩(wěn)定，將電源開關(guān)打開，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時和在不測定時應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。
選定波長：根據(jù)實驗要求，轉(zhuǎn)動波長調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長。
固定靈敏度檔：根據(jù)有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2～0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
調(diào)節(jié)“0”點：
輕輕旋動調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照)。
調(diào)節(jié)T=100%：
將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的格內(nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100%，即，表頭指針恰好指在T=100%處。
測定：輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華，讀數(shù)后，打開比色皿暗箱蓋。
關(guān)機(jī)：實驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。
使用分光光度計的注意事項都是什么？
1)為了防止光電管疲勞：
不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷，以延長光電管使用壽命。
2)比色皿的使用方法：
①拿比色皿時：手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。
?、谇逑幢壬髸r：一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如，比色皿被有機(jī)物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。每次做完實驗時，應(yīng)立即洗凈比色皿。
③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干：以保護(hù)透光面。
?、軠y定有色溶液吸光度時：一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時，通常都按由稀到濃的順序測定，以減小測量誤差。
?、菰趯嶋H分析工作中：通常根據(jù)溶液濃度的不同，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。
分光光度計的維護(hù)和保養(yǎng):分光光度計是精密儀器，正確安裝、使用和保養(yǎng)對保持儀器良好的性能和保證測試的準(zhǔn)確度有重要作用。
1.對儀器工作環(huán)境的要求:分光光度計應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺上，(周圍不應(yīng)有強(qiáng)磁場,以防電磁干擾)，室內(nèi)溫度應(yīng)保持在(10～30)℃。室內(nèi)應(yīng)干燥，相對濕度宜控制在<85%，室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體，光線不宜過強(qiáng)。
2.儀器保養(yǎng)和維護(hù)方法
(1)儀器工作電壓一般為220V，允許±10%的電壓波動。為保持光源燈和檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性，在電源電壓波動較大的實驗室好配備穩(wěn)壓器。
(2)為了延長光源使用壽命，在不用時不用開光源燈。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應(yīng)及時更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置，不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附，若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。
(3)單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內(nèi)，不能拆開，為防止色散元件受潮發(fā)霉，必須經(jīng)常更換干燥劑。
(4)必須正確使用吸收池，保護(hù)吸收池光學(xué)面。
(5)光電轉(zhuǎn)換元件不能長時間曝光，應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。
