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PLoS Biol:利用試紙條30秒內(nèi)純化動物、植物和微生物的核酸

閱讀:1269      發(fā)布時間:2017-11-23
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圖片來自Michael Mason。

2017年11月23日//---在一項(xiàng)新的研究中,來自澳大利亞昆士蘭大學(xué)的研究人員開發(fā)出一種新的試紙條(dipstick)而能夠快速地檢測病原體和診斷人類、動物和植物疾病。相關(guān)研究結(jié)果于2017年11月21日發(fā)表在PLoS Biology期刊上,論文標(biāo)題為“Nucleic acid purification from plants, animals and microbes in under 30 seconds”。

這種試紙條的制作方法為將一張GE公司的Whatman 1級濾紙的一半浸在熔化的蠟中,從而產(chǎn)生一個不透水的區(qū)域;在蠟?zāi)毯?,這張部分涂蠟的濾紙被切割成寬44毫米的長方形條(大約91%的區(qū)域涂上蠟,9%的區(qū)域未涂蠟);這個長方形條隨后被切割成寬大約2毫米的試紙條,每根試紙條具有一個核酸結(jié)合區(qū)和一個手柄。

為了利用這種試紙條純化核酸,這些研究人員以葉子組織為例進(jìn)行說明。他們將葉子組織浸入到含有500μl細(xì)胞裂解液(20 mM Tris [pH 8.0], 25 mM NaCl, 2.5 mM EDTA, 0.05% SDS)和兩個滾珠的試管中。他們接著讓這種試紙條浸入到葉子組織的粗提液中來結(jié)合核酸,隨后又讓它浸入到清洗液中(10 mM Tris [pH 8.0], 0.1% Tween-20),zui后將它浸入到擴(kuò)增反應(yīng)液中,從而結(jié)合到它上的核酸洗脫下來。在洗脫后,這種試紙條被丟棄,并將擴(kuò)增反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到一臺熱循環(huán)儀中進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。

昆士蘭大學(xué)農(nóng)業(yè)與食品科學(xué)學(xué)院的Jimmy Bola教授說,這種技術(shù)能夠在不存在專業(yè)設(shè)備或人員的情形下在短短30秒內(nèi)提取出活生物中的DNA和RNA。

他說,“我們成功地在巴布亞新幾內(nèi)亞偏遠(yuǎn)的種植園中利用這種試紙條診斷生病的樹,而且將它應(yīng)用于牲畜、人類樣品和食品中的病原體,以及用于檢測環(huán)境風(fēng)險,如被大腸桿菌污染的水。

這種方法將給發(fā)達(dá)國家和發(fā)展中國家的人提供一種解決一系列農(nóng)業(yè)、健康和環(huán)境問題的新方法。”

Bola教授說,當(dāng)前的商業(yè)化試劑盒能夠通過一種漫長而繁瑣的過程來分離DNA和RNA,這需要專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,這就是在現(xiàn)場開展這種分離是不切實(shí)際的。

這些研究人員起初為特定的植物開發(fā)出這種試紙條技術(shù),隨后發(fā)現(xiàn)它能夠純化來自很多農(nóng)業(yè)上重要的植物物種的DNA。

Bola教授說,“我們發(fā)現(xiàn)它具有更加廣泛的意義,這是因?yàn)樗軌虮挥脕砑兓瘉碜匀搜?、病毒、源自被感染的植物或動物的真菌性病原體和細(xì)菌性病原體的DNA或RNA。”

昆士蘭大學(xué)的商業(yè)化公司UniQuest已為這種試紙條技術(shù)提交了申請,并且正在尋找商業(yè)伙伴來擴(kuò)大它的應(yīng)用。

Bola教授說,“我們的技術(shù)消除了對用于樣品制備的專業(yè)實(shí)驗(yàn)室的需求,而且比任何現(xiàn)存的其他技術(shù)更加簡單、更加快速和更加便宜,從而使得每個人都能夠得到診斷。”

“我們的試紙條與我們的團(tuán)隊開發(fā)出的其他技術(shù)相結(jié)合在一起,意味著從樣品收集到獲得zui終的診斷結(jié)果的這整個診斷過程能夠在醫(yī)院、農(nóng)場、旅館房間或者甚至在偏遠(yuǎn)地區(qū)(如熱帶叢林)中輕松地開展。”(生物谷 Bioon.com)

參考資料:

Yiping Zou, Michael Glenn Mason, Yuling Wang et al. Nucleic acid purification from plants, animals and microbes in under 30 seconds. PLoS Biology, Published: November 21, 2017, doi:10.1371/journal.pbio.2003916

 

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