斑節(jié)對蝦桿狀病毒PCR試劑盒

Penaeus Monodon-type Baculovirus(MBV)

產(chǎn)品及特點

斑節(jié)對蝦桿狀病毒（Penaeus Monodon-type Baculovirus，MBV)是引 起多種對蝦生病的流行性傳染病，發(fā)病后常常會導(dǎo)致病蝦食欲減少，活動呆滯， 鰓、附肢和體表常帶有大量的附生生物，受感染后幼體除部分體色加深外，并 無特別的癥狀，多數(shù)攜帶病毒的蝦活動仍正常。幼體群常常無明顯的癥狀表現(xiàn) 而出現(xiàn)大量死亡，死亡率與養(yǎng)殖環(huán)境有關(guān)，該病毒的感染對海產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)往往會 造成較大的經(jīng)濟損失，因此快速檢測斑節(jié)對蝦桿狀病毒具有重要意義。本試劑 盒根據(jù)熒光定量 PCR 原理開發(fā)，它具有下列特點： 

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增斑節(jié)對蝦桿狀病毒，與其他病毒沒 有交叉反應(yīng)。 

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

斑節(jié)對蝦桿狀病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。