真鯛虹彩病毒PCR試劑盒

Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)

產品及特點

真鯛虹彩病毒(Red Sea Bream Iridovirus，RSIV)會引起真鯛虹彩病毒 病，主要是水平傳播，通過水平途徑在水體、餌料和魚體間進行傳播和感染， 主要危害幼魚，發(fā)病后死亡率高達 37.9%。病魚體色變黑，嗜睡，貧血癥狀明 顯；體表和鰓出血，鰓上有瘀斑，呈灰白色；脾臟肥大。病毒對魚體上皮組織和 內皮組織親嗜性較強，對脾臟、腎臟等魚類造血器官和組織的破壞尤為嚴重， 從而導致病魚貧血、多器官衰竭而死亡，因此真鯛虹彩病毒的快速準確鑒定對 該病的預防和檢疫有著重要作用。本產品就是根據真鯛虹彩病毒保守區(qū)設計引 物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增真鯛虹彩病毒，與其他病原沒有交 叉反應。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

真鯛虹彩病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。