BT-474/TAM（人乳腺癌細(xì)胞莫昔芬耐藥）

細(xì)胞名稱(chēng)

BT-474TAM [BT474]（人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞）

細(xì)胞別稱(chēng)

BT-474TAM

商品貨號(hào)

XY-H022Y2

種屬來(lái)源

人

年齡性別

女；60歲

組織來(lái)源

乳腺

生長(zhǎng)特性

鐵壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格

1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)

無(wú)

培養(yǎng)基

89% RPMI-1640+10%FBS+1%PS

培養(yǎng)條件

氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件

無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間

~24-30小時(shí)

二、細(xì)胞接收后的處理

1) 收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于室溫放置約1h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2) 離心管直接在1000RPM條件下離心5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，根據(jù)離心后的沉淀量進(jìn)行傳代，轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶中后，請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3) 懸浮細(xì)胞：傳代時(shí)使用【半換液法】對(duì)細(xì)胞狀態(tài)有利，因此我?guī)旖ㄗh您使用【半換液法】進(jìn)行傳代，剛收到細(xì)胞時(shí)建議1:2傳代較為合適。

4) 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。

三、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含8mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)?！景霌Q液法】懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)的細(xì)胞，可以通過(guò)向培養(yǎng)瓶中添加培養(yǎng)基來(lái)維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，一般情況下細(xì)胞密度維持在1×10⁵~1×10⁶

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