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毛細(xì)管電泳儀技術(shù)原理及其在生物大分子分離中的應(yīng)用

閱讀：194 發(fā)布時(shí)間：2025-7-4
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毛細(xì)管電泳儀（CE）是一種以高壓直流電場為驅(qū)動(dòng)力、毛細(xì)管為分離通道的液相分離技術(shù)，其核心原理基于帶電粒子在電場中的遷移速率差異實(shí)現(xiàn)高效分離。在毛細(xì)管電泳系統(tǒng)中，內(nèi)徑20-200μm的石英毛細(xì)管內(nèi)填充緩沖液，當(dāng)施加10-30kV高壓時(shí)，帶電粒子在電場作用下遷移，其遷移速率由電泳淌度（與分子電荷、大小相關(guān)）和電滲流（EOF）共同決定。電滲流源于毛細(xì)管內(nèi)壁硅羥基解離產(chǎn)生的負(fù)電荷，吸引緩沖液中的陽離子形成雙電層，在高壓下推動(dòng)液體整體向陰極流動(dòng)，其速率通常比電泳淌度大一個(gè)數(shù)量級，成為分離的主要驅(qū)動(dòng)力。帶正電的粒子因與電滲流同向遷移而最先流出，中性粒子次之，帶負(fù)電的粒子最后流出，從而實(shí)現(xiàn)組分分離。
在生物大分子分離領(lǐng)域，毛細(xì)管電泳儀展現(xiàn)出優(yōu)勢。其高分辨率可區(qū)分蛋白質(zhì)的電荷異構(gòu)體，例如通過毛細(xì)管區(qū)帶電泳（CZE）分離單抗藥物的電荷變異體，或利用毛細(xì)管等電聚焦（CIEF）分離等電點(diǎn)差異僅0.03的蛋白質(zhì)變異體。對于核酸分析，CE可實(shí)現(xiàn)堿基、核苷酸的高靈敏度檢測，支持DNA測序、PCR產(chǎn)物分析及蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究。此外，膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜（MEKC）通過添加表面活性劑形成膠束相，可同時(shí)分離帶電和中性分子，適用于氨基酸、藥物等小分子的手性分離。相較于傳統(tǒng)液相色譜，CE具有樣品用量?。╪L級）、分析速度快（數(shù)分鐘至數(shù)十分鐘）的特點(diǎn)，且無需固定相，避免了色譜柱老化問題，成為生物制藥、基因工程等領(lǐng)域的分析工具。

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