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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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iTRAQ蛋白質(zhì)組學技術服務簡單介紹：
蛋白質(zhì)組分析(proteomics) 是對生物蛋白組(proteome) 的分析與檢測，蛋白組分析先要將混合蛋白質(zhì)分離, 分離的主要方法是蛋白雙向電泳。已被分離的蛋白質(zhì)由質(zhì)譜分析對其進行鑒定。
iTRAQ蛋白質(zhì)組學技術服務的4種同位素標記試劑由４種相對分子質(zhì)量分別為114、115、116和117的報告基團(reporter group)，相對分子質(zhì)量分別為31、30、29 和28 的質(zhì)量平衡基團(balance group)以及一個相同的肽反應標記試劑基團(peptide reactive group)組成。不同的報告基團分別與相應的平衡基團相配后，相對分子質(zhì)量均為145，即等量異位標簽(isobaric tag)。
將蛋白質(zhì)裂解為肽段，然后用iTRAQ試劑進行差異標記。由于iTRAQ試劑是等量的，即不同同位素在標記同一多肽后在*級質(zhì)譜檢測，分子量相同，用串聯(lián)質(zhì)譜方法對在*級質(zhì)譜檢測到前體離子(precursor ion)進行碰撞誘導解離，產(chǎn)物離子通過第二級質(zhì)譜進行分析。在二級質(zhì)譜分析過程中，報告基團、質(zhì)量平衡基團和多肽反應基團之間的鍵斷裂，質(zhì)量平衡基團丟失，產(chǎn)生低質(zhì)荷比(m/z)的報告離子。由于二級質(zhì)譜可分析相對分子質(zhì)量相差1的報告基團，不同報告基團離子強度的差異就代表了它所標記的多肽的相對豐度。同時，多肽內(nèi)的酰胺鍵斷裂，形成一系列b 離子和y 離子，得到離子片段的質(zhì)量數(shù)，通過數(shù)據(jù)庫查詢和比較，可以鑒定出相應的蛋白質(zhì)前體.
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