1. 準(zhǔn)備工作

- 確認(rèn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模菏菣z測(cè)抗原還是抗體。

- 確認(rèn)所需要的材料，如樣品、緩沖液、洗滌液、酶標(biāo)二抗、底物等。

- 準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)設(shè)備，如酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、移液器、培養(yǎng)板等。

- 將試劑從4℃冷藏或者-20℃冷凍處取出，退冰至室溫。

2. 樣本和試劑準(zhǔn)備

- 根據(jù)需要配置緩沖液和其他試劑。

- 準(zhǔn)備樣品：可能需要稀釋或處理樣品以適應(yīng)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

- 預(yù)處理微孔板：如果使用預(yù)包被板，通常不需要額外處理。

3. 樣品加入

- 使用移液器準(zhǔn)確加入樣品到微孔板的孔中。

- 添加對(duì)照樣品，包括陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照。

4. 孵化

- 按照說(shuō)明書(shū)上的時(shí)間和溫度條件進(jìn)行孵化。

- 有的步驟可能需要在溫育后進(jìn)行洗板，去除未結(jié)合的物質(zhì)。

5. 檢測(cè)

- 添加酶聯(lián)抗體和底物，對(duì)于含有酶標(biāo)記的抗體或者抗原進(jìn)行檢測(cè)。

- 再次孵化，允許底物與酶反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化或發(fā)光。

6. 結(jié)果讀取

- 使用酶標(biāo)儀讀取各孔顏色變化的強(qiáng)度，測(cè)定吸光度（OD值）。

- 結(jié)果通常與對(duì)照曲線(xiàn)相比較，以確定樣品中的目標(biāo)分子濃度。

7. 結(jié)果分析

- 將數(shù)據(jù)記錄下來(lái)，并使用適當(dāng)?shù)能浖M(jìn)行分析。

- 根據(jù)制造商提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中的抗原或抗體濃度。

8. 清理和維護(hù)

- 遵照生物安全規(guī)定處理微孔板和其他試驗(yàn)材料。

- 清潔實(shí)驗(yàn)設(shè)備和工作區(qū)域，為下次實(shí)驗(yàn)做好準(zhǔn)備。

注意事項(xiàng)：

- 仔細(xì)閱讀試劑盒說(shuō)明，在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行必要的準(zhǔn)備。

- 嚴(yán)格按照說(shuō)明操作，避免交叉污染。

- 注意試劑的有效期和存儲(chǔ)條件。

- 使用適當(dāng)?shù)纳锇踩僮饕?guī)程處理樣品和廢棄物。