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少量細(xì)胞標(biāo)本的制備實驗步驟

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少量細(xì)胞標(biāo)本的制備實驗步驟

(1)取材:少量細(xì)胞連同培養(yǎng)基一起移人離心管中,800r/min離心5min。細(xì)胞沉淀加4%的多聚甲醛,輕輕混勻4℃固定1h。PBS緩沖液漂洗,800r/min離心5min,連續(xù)3次。將微量移液管的塑料槍頭過火焰,使其成為封閉的錐形管,將細(xì)胞沉淀(約200μl)移入管內(nèi),加5μl新鮮人血漿,輕輕混勻后,然后加入2.5%戊二醛(pH 7. 2~7.3。0.1moL/L PBS緩沖液配制)100μl,再輕輕混勻,4℃靜止4h。離心條件同前。刀片切去槍頭的末端,用細(xì)針挑出細(xì)小的細(xì)胞團(tuán)塊,PBS緩沖液漂洗多次。

(2)固定:1%鋨酸固定2h,PBS緩沖液漂洗、丙酮脫水,包埋,染色,切片自然干燥后觀察。
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞     Mouse
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)     Mouse
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)     Mouse
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)     Mouse
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞     Human
人腦血管平滑肌細(xì)胞     Human
人海馬神經(jīng)元     Human
人少突膠質(zhì)細(xì)胞     Human

 

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