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細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器的連續(xù)式操作模式

時間:2017-2-24閱讀:658
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原代細(xì)胞連續(xù)式操作是一種常見的懸浮培養(yǎng)模式,采用機械攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng)。該模式是將細(xì)胞接種與一定體積的培養(yǎng)基后,為了防止衰退期的出現(xiàn),在細(xì)胞達zui大密度之前,以一定速度向生物反應(yīng)器連續(xù)添加新鮮培養(yǎng)基;與此同時,含有細(xì)胞的培養(yǎng)物以相同的速度連續(xù)從反應(yīng)器流出,以保持培養(yǎng)體積的恒定。理論上講,該過程可無限延續(xù)下去。連續(xù)培養(yǎng)的zui大優(yōu)點是反應(yīng)器的培養(yǎng)狀態(tài)可以達到恒定,細(xì)胞在穩(wěn)定狀態(tài)下生長。穩(wěn)定狀態(tài)可有效的延長分批培養(yǎng)中的對數(shù)生長期。在穩(wěn)定狀態(tài)下細(xì)胞所處的環(huán)境條件如營養(yǎng)物質(zhì)濃度、產(chǎn)物濃度、pH值可保持恒定,原代細(xì)胞濃度以及細(xì)胞比生長速率可維持不變。細(xì)胞很少受到培養(yǎng)環(huán)境變化帶來的生理影響,特別是生物反應(yīng)器的主要營養(yǎng)物質(zhì)葡萄糖和谷氨酰胺,維持在一個較低的水平,從而使他們的利用效率提高,有害產(chǎn)物積累有所減少。然而在高的稀釋率下,雖然死細(xì)胞和細(xì)胞碎片及時清除,細(xì)胞活性高zui終細(xì)胞密度得到提高;可是產(chǎn)物卻不斷在稀釋,因而產(chǎn)物濃度并為提高;尤其是細(xì)胞和產(chǎn)物不斷的稀釋,營養(yǎng)物質(zhì)利用率、細(xì)胞增長速率和產(chǎn)物速率低下。此外,連續(xù)式操作還有一些不足,如:1)由于是開放式操作,加上培養(yǎng)周期較長,容易造成污染;2)在長周期的連續(xù)培養(yǎng)中,細(xì)胞的生長特性以及分泌產(chǎn)物容易變異;3)對設(shè)備、儀器的控制技術(shù)要求較高。 
原代細(xì)胞連續(xù)式操作的特點為:1)細(xì)胞維持持續(xù)指數(shù)增長;2)產(chǎn)物體積不斷增長;3)可控制衰退期與下降期。 

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