CDK抑制劑（Purvalanol B）公司正在出售的產(chǎn)品：MCM7/FITC 熒光標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白7抗體IgG乳糖，無(wú)水 Ph Eur,USP,NF,JP
MCP-1/FITC 熒光標(biāo)記巨噬趨化蛋白-1抗體IgG氧化 AR,98%,200目
MCP-1/FITC 熒光標(biāo)記巨噬趨化蛋白-1抗體(人)IgG氧化 99.9% metals basis,200目
MCP-2/CCL8/F

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
大禿馬勃*人大內(nèi)皮Anti-UNG Antibody人淀粉樣前體蛋白(βAPP)

繩狀籃狀菌人全段甲狀旁腺Anti-URB1 Antibody人β2糖蛋白(β2-GP)

長(zhǎng)裙竹蓀人降鈣Anti-URI1 Antibody人β2糖蛋白(β2-GP)

嗜熱脂肪地芽孢桿菌人促甲狀腺Anti-Urocortin Antibody人α乳清蛋白(α-La)

雜色曲霉原變種人皮質(zhì)Anti-USO1 Antibody人α乳清蛋白(α-La)

 米曲霉人唾液皮質(zhì)Anti-USF2 Antibody人N-乙?；?絲酰-天門(mén)冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)

野土地桿菌人雌二Anti-USP11 Antibody人N-乙酰基-絲酰-天門(mén)冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)

中瀨擲孢酵母人脫氫表雄硫酯Anti-USP13 Antibody人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)

金黃殼囊孢菌人睪Anti-USP19 Antibody人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)

谷棒桿菌人游離睪Anti-USP18 Antibody人腦紅蛋白(NGB)

大團(tuán)囊蟲(chóng)草人雄烯二Anti-USP19 Antibody人腦紅蛋白(NGB)

蕈狀芽孢桿菌人雌三Anti-USP30 Antibody人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)

扣囊復(fù)膜孢酵母人17羥孕Anti-USP30 Antibody人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)

皺曲毛殼人狀腺原Anti-USP24 Antibody人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)

食木薯乳桿菌人甲狀腺Anti-USP36 Antibody人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)

柱狀田頭菇（茶樹(shù)菇、楊樹(shù)菇）人游離甲狀腺Anti-USP32 Antibody人髓磷脂堿性蛋白(MBP)

泛特異性蛋白28抗體梭孢環(huán)柄菇正常細(xì)胞

二磷葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移2抗體土黃錐蓋菇豚鼠皮膚細(xì)胞

泛相關(guān)蛋白1抗體鼻咽癌相關(guān)基因20蛋白亞灰光柄菇發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞

廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體黑紫紅菇小鼠紅白血病細(xì)胞
CDK抑制劑（Purvalanol B）澳型核果褐腐病 4-氨基-3-肼基-5-巰基-1,2,4-三氮唑

甜芝 沒(méi)食子酸甲酯

肺炎克雷伯氏 4-芐基氨基-7-并氧雜惡二唑

焦曲霉 漏蘆甾酮

米根霉 1,2-茚滿二酮

迪茨氏屬 3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯磺酸鈉

蘇云金芽孢桿 律草酮

肉梭 C型 龍膽酸

亞粘團(tuán)串珠鐮孢 N-乙基-N-(3-磺基)-3-甲氧基苯鈉鹽

新月彎孢 藜蘆

東方醋桿 β-萘紫

禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病 硫磺S

黃曲霉 天竺葵（化花葵）

蒼黃瘡痂鏈霉 硫黃T

枯草芽孢桿 藍(lán)萼甲