BTK抑制劑(Ibrutinib-biotin)公司正在出售的產(chǎn)品：Torc2/Crtc2/FITC 熒光標(biāo)記CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體IgG
Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171)/FITC 熒光標(biāo)記化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體IgG
Gentamicin Monoclonal Antibody /Gold 膠體金離子標(biāo)記小鼠抗慶大霉單克隆抗體Ig

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

蘇云金芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)

小棒桿菌Bacillus sp.大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)

果生鏈核盤菌Bacillus sp.大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)

解沒食子鏈球菌Bacillus sp.大鼠γ干擾(IFN-γ)

蠟狀芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠γ干擾(IFN-γ)

嗜麥芽假單胞菌Bacillus sp.大鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)

*百脈根根瘤菌Bacillus sp.大鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)

阿納托亞青霉 Bacillus sp.大鼠粒巨噬集落激因子(GM-CSF)

栗疫病菌Bacillus sp.大鼠粒巨噬集落激因子(GM-CSF)

淡紫擬青霉Bacillus sp.大鼠膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)

大腸埃希氏菌Bacillus sp.大鼠膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)

熒光假單胞菌Bacillus sp.大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)

變幻青霉Bacillus sp.大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)

Hypoxylon  perforatumBacillus sp.大鼠纖連蛋白(FN)

根霉Bacillus sp.大鼠纖連蛋白(FN)

委內(nèi)瑞鏈霉菌菊糖變Bacillus sp.大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)

硫氧還蛋白抗體金黃桿菌灰綠犁頭霉

胸苷合成抗體多粘類芽胞桿菌棘孢小單孢菌福建亞種

原肌球蛋白1抗體滕黃短小桿菌棘孢小單孢菌絳紅變種

辣椒受體3抗體堀越氏芽孢桿菌假面神菌屬菌種
BTK抑制劑(Ibrutinib-biotin)貝萊斯芽胞桿 牛蒡子苷

吡咯伯克霍爾德氏 土貝母苷甲

二型傘形霉 柴胡皂苷B2

貪噬屬 柴胡皂苷B1

庫特氏屬 柴胡皂苷D

硬結(jié)節(jié)桿 柴胡皂苷C

芽孢桿 柴胡皂苷A

大腸埃希 常春藤皂苷B

孟氏假單胞 竹節(jié)香附A

地衣芽孢桿 五加苷E

豬瘟陰、陽性血清國(guó)家參考品 紫丁香苷（五加苷B）

云南鏈霉 五加皂苷B

焦曲霉 人參三

網(wǎng)紋馬勃 人參二

Pseudomonas 原人參三