兔椎間盤纖維環(huán)原代細胞公司正在銷售的產品：兔原代椎間盤纖維環(huán)細胞 人胚皮膚成纖維樣細胞 英文名稱： HES 人主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒 人主動脈平滑肌細胞培養(yǎng) 人表皮角質形成細胞培養(yǎng)基 100mL 腸靜脈內皮細胞 人原代卵巢上皮細胞

兔椎間盤纖維環(huán)原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

兔椎間盤纖維環(huán)細胞分離自椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環(huán)的前側及兩側較厚，而后側較薄。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶，后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細胞密度為9000個細胞/mm3，其外層的細胞呈梭型，主要屬于纖維細胞，內層細胞呈圓形，主要屬于軟骨細胞。在培養(yǎng)的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現(xiàn)，它們的核較圓，核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網(wǎng)和滑面內質網(wǎng)。細胞質內線粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒，纖維環(huán)細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少，纖維環(huán)的生物性能就會減弱，椎間盤開始退變。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔椎間盤纖維環(huán)細胞采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化法并結合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔椎間盤纖維環(huán)細胞經Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

人細胞裂解液   EVI2A Others Human 人 EVI2A 人細胞裂解液   EPCAM Others Human 人 EpCAM / OP1 人細胞裂解液   C2C12, 小鼠肌原細胞  SGC-7901   人胃癌細胞  豚鼠肺細胞 兔原代腹腔主動脈平滑肌細胞 小鼠原代子宮微血管內皮細胞

PP-2A (protein phosphatase 2A 0.5mgPP-2A (protein phosphatase 2A) 蛋白質0酸酶-2A(抗原)

CLIC1 Protein Human 重組人 CLIC1 蛋白

HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

NBL1 Protein Human 重組人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 (Fc 標簽)

USP7重組人 USP7 / HAUSP 蛋白 (aa 208-560, His & GST 標簽) Protein

大鼠含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)試劑盒 ，英文名： vWA1 ELISA Kit

Rat 6 keto prostaglandin (6-K-PG) ELISA Kit 大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)試劑盒

RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit 大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforeNOS(MouseEndothelialniicoxidesyhase)ELISAKit小鼠內皮型合成酶

細胞0脂皮爾斯(Pearse)染色試劑盒50次

Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit大鼠白血病抑制因子(LIF)試劑盒

組織因子抑制物 (TFPI)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

轉移生長因子 - a (TGF -a )   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

轉移生長因子 -β1(TGF- b 1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

轉移生長因子 -β2(TGF- b 2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔椎間盤纖維環(huán)原代細胞小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat pulmonary surfacta associated protein A (SP-A) ELISA Kit 大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)試劑盒

Humangalactose-6-sulphatesulphatase,Gal-6SELISAKit 人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)試劑盒 96T/48T 進口分裝

包蟲抗體IgG(間接法二步法)

油菜培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

Mouseierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IFNA1重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白  Protein

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

IGJ重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白 (His 標簽) Protein

B3GNT2 Protein Human 重組人 B3GNT2 蛋白

TCN2 Protein Mouse 重組小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 (His 標簽)