兔氣管平滑肌原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：兔原代氣管平滑肌細胞 迪慶綿羊皮膚成纖維樣細胞 英文名稱： DQSHS1 DH82 狗惡性組織細胞增生癥細胞 1ml/T75 人關(guān)節(jié)軟骨細胞培養(yǎng)基 100mL 淋巴管內(nèi)皮細胞 人原代氣管上皮細胞

兔氣管平滑肌原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

兔氣管平滑肌細胞分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用；能夠保持氣道張力，維持氣道管狀形態(tài)，從而有利于氣體流通，保持肺部通氣。氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一，其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔氣管平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的兔氣管平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme 兔原代睪丸支持細胞 大鼠原代鞏膜成纖維細胞

phospho GAP-43(pSer41 0.5mgphospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗原

BIN2 Protein Human 重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 (His 標簽)

NA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽) Protein

CNTN2 Protein Human 重組人 Contactin 2 / CNTN2 蛋白 (His 標簽)

SETD8重組人 SETD8 / PR-Set7 蛋白 Protein

大鼠紅細胞生成素(EPO)試劑盒 ，英文名： EPO ELISA Kit

Rabbit endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒

漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸試劑盒(-PCR法) 48T

CLIAKitforMouseClusterofdiffereiation3,CD3ELISAKit小鼠CD3分子

體液環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKit17-OHP人17羥孕同

豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit   ELISA. 

豬血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)ELISAKit   ELISA. 

豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISAKit   ELISA. 

豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAKit   ELISA.

兔氣管平滑肌原代細胞豬核轉(zhuǎn)錄因子kb-p65(NF-kB p65)ELISA 試劑盒

Human desmin (Des) ELISA Kit 人結(jié)蛋白(Des)試劑盒

PorcineC-reactiveprotein,CRPELISAKit 豬C反應蛋白(CRP)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha-Gal(MouseAlpha-galactoyl)ELISAKit小鼠α半乳糖基抗原

血液結(jié)合(酯化)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Placalmodulin,CAMELISAKit植物鈣調(diào)素(CAM)試劑盒

LON PROTEASE重組大腸桿菌 Lon protease 蛋白 (His 標簽) Protein

TNF-alpha 壞死因子-α抗原 0.5mgTNF-alpha 壞死因子-α抗原

TNK2重組人 ACK1 / TNK2 蛋白 (GST 標簽) Protein

AMY2B Protein Human 重組人 AMY2B 蛋白

NGF Protein Human 重組人 β-NGF / Beta-NGF 蛋白