A3adenosine受體激動劑(2-Cl-IB-MECA)公司正在出售的產(chǎn)品：KCNC4/KV3.4/FITC 熒光標(biāo)記離子通道蛋白Kv3.4抗體IgG代三吡咯烷鏻六氟鹽 98%
Lectin/FITC 熒光標(biāo)記抗凝集抗體IgG多肽試劑TCTU 98%
LEF-1/FITC 熒光標(biāo)記淋巴增強(qiáng)因子-1抗體IgG2--1,3-二咪唑六氟鹽 98%
L-enk/FITC 熒光標(biāo)記抗亮氨腦啡肽抗

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
烯霉鏈霉菌大鼠白介12Anti-STON1 Antibody人免疫球蛋白M(IgM)

淺絳紅鏈霉菌人抗乙型肝炎病核心IgM抗體Anti-STRADA Antibody人纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)

節(jié)桿菌屬大鼠血管內(nèi)皮生長因子BAnti-STRADA Antibody人纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)

釀酒酵母人抗乙型肝炎病表面抗體Anti-STRN Antibody人纖溶原激活物抑制因子(PAI)

平菇大鼠白介12Anti-STX1A Antibody人纖溶原激活物抑制因子(PAI)

釀酒酵母大鼠血管內(nèi)皮生長因子CAnti-STX2 Antibody人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)

放射形根瘤菌人抗乙型肝炎病e抗體Anti-SUCNR1 Antibody人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)

炭疽芽孢桿菌大鼠白介11Anti-SUGP2 Antibody人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)

玉米黑粉菌人抗流行性出血熱病抗體IgMAnti-SUMO-3 Antibody人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)

大腸埃希氏菌人抗狂犬病抗體Anti-SUMO1P1 Antibody人血小板衍生生長因子(PDGF)

浸麻類芽孢桿菌大鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4Anti-SUPT20H Antibody人血小板衍生生長因子(PDGF)

泡盛曲霉人抗甲型肝炎病IgM抗體Anti-SUMO2/3 Antibody人血小板活化因子(PAF)

畢赤酵母大鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3Anti-SV2C Antibody人血小板活化因子(PAF)

枯草芽孢桿菌大鼠血管內(nèi)皮生長因nti-SUPT3H Antibody人組織型纖溶原激活劑(t-PA)

李色鏈霉菌人抗甲型肝炎病IgG抗體Anti-SVOP Antibody人組織型纖溶原激活劑(t-PA)

根瘤菌屬人抗副流感病IgM抗體Anti-SURF1 Antibody人組織因子(TF)

血栓A2受體抗體大麗輪枝霉肌動蛋白結(jié)合蛋白1B單抗7

腱調(diào)蛋白抗體軟骨調(diào)節(jié)樣1蛋白亞炭角菌雜交瘤細(xì)胞CD25

四分子交聯(lián)體17抗體四旋蛋白大孢鏈格孢小鼠B淋巴細(xì)胞7

四分子交聯(lián)體15抗體四旋蛋白長柄鏈格孢（斜面）小鼠潘氏細(xì)胞雜交瘤
A3adenosine受體激動劑(2-Cl-IB-MECA)鹽古桿 油酸

紫棕炭團(tuán) 鹽酸伊立替康

斐濟(jì)球腔 愈創(chuàng)木

壁節(jié)桿 氧化石蒜堿

甲速測試劑盒  鹽酸白屈菜紅堿

Achromobacter xylosoxidans subsp. xylosoxidans 銀杏酸

釀酒酵母 野菊花內(nèi)酯

三葉草根瘤 2-O-乙酰山椒子烯酮

大腸桿 柚皮-7-O-葡萄糖酸苷

鱗皮蘑菇 茵芋堿

彎頸霉屬 乙酰蝙蝠葛蘇林堿

異角狀盤多毛孢 一葉萩堿

米曲霉 蕓苔內(nèi)酯

番茄葉點* 乙酰黃芪皂苷I

黃色青霉 鹽酸去氫駱駝蓬堿