β-catenin抑制劑(JW 55)公司*的產(chǎn)品：Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化血管生成素受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Kir6.2 peptide ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
核糖核蛋白抗原SSA抗體 Anti-

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：β-catenin抑制劑(JW 55)

英文名稱：JW 55

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

海床游動(dòng)微菌Mycobacterium abscessus豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)

黑葡萄穗霉Klebsiella oxytoca豬β干擾(IFN-β/IFNB)

聚生殼菌Arthrobacter nicotianae豬β干擾(IFN-β/IFNB)

大腸埃希氏菌Arthrobacter nicotianae豬食欲受體(OXR)

普通紅色桿菌Brevundimonas subribrioides豬食欲受體(OXR)

喜土毛束霉Burkholderia cepacia豬食欲/阿立新B(OX-B)

芽植單胞菌屬Lactobacillus amylophilus豬食欲/阿立新B(OX-B)

地羅河桿菌Lactobacillus amylovorus豬白介1α(IL-1α)

香菇Lactobacillus gasseri豬白介1α(IL-1α)

化妝品  二惡烷Lactobacillus johnsonii豬促胃液受體(GsaR)

粉紅單端孢Lactobacillus parakefiri豬促胃液受體(GsaR)

蘇云金芽胞桿菌加拿大亞種Geobacillus stearothermophilus豬生長激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)

三側(cè)毛殼Halobacillus halophilus豬生長激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)

雞傷寒沙門氏菌Halobacillus trueperi豬(Dex)

谷棒桿菌Xanthomonas campestris豬(Dex)

圓弧青霉Halobacillus litoralis豬D二聚體(D2D)

4羥基壬烯抗體根瘤菌(紅豆草)沙門氏菌第IIIb亞屬

精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體根瘤菌(小冠花)渥興頓沙門氏菌

神經(jīng)生長相關(guān)蛋白SCG10抗體產(chǎn)油油脂酵母甲型副傷寒沙門氏菌無動(dòng)力變種

S100A4抗體布魯塞爾德克酵母德比沙門氏菌
β-catenin抑制劑(JW 55)耐鹽糖霉 秦皮

灰產(chǎn)色鏈霉 黃芩

Flavobacterium araucananum LM-19-Fp(T) 野黃芩苷

大腸埃希 黃芩苷

白布勒擔(dān)孢酵母 萊苞迪甙A

土曲霉 遠(yuǎn)志皂苷元

柱孢犁頭霉黑色變種 遠(yuǎn)志酸

水稻節(jié)桿 異歐前胡

葡萄座腔 歐前胡

齒白木層孔 染料木苷

耐久腸球 黃豆黃

醬油曲霉 大豆苷

腐皮鐮孢 大豆苷元

產(chǎn)二鏈霉 染料木

Microbacterium trichothecenolyticum 鏈霉蛋白