EGFR抑制劑(Sapitinib)公司*的產(chǎn)品：phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC 熒光標(biāo)記化核因子κB激alpha抑制劑抗體IgG苯汞 分析標(biāo)準(zhǔn)品（劇品）
phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC 熒光標(biāo)記化核因子κB激alpha抑制劑抗體IgG2,4,6-三(二氨) 95%
Phospho-IKK alpha/

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：EGFR抑制劑(Sapitinib)

英文名稱：Sapitinib

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

腐皮殼屬大鼠腦腸肽Anti-RPA32 Antibody人羥脯(Hyp)

無人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體Anti-RPAP2 Antibody人羥脯(Hyp)

木霉屬小鼠血清淀粉樣蛋白AAnti-RPA4 Antibody人一氧化氮(NO)

薛瓦酵母小鼠抗中性粒/中心體抗體Anti-RPC2 Antibody人一氧化氮(NO)

長枝木霉大鼠6前列腺Anti-RPL10 Antibody人上皮中性?；罨?8(ENA-78/CXCL5)

玉米乳桿菌人抗中性粒顆粒抗體Anti-RPL10 Antibody人上皮中性?；罨?8(ENA-78/CXCL5)

根瘤菌人抗中性?？贵wAnti-RPH3A Antibody人維生C(VC)

煉乳假絲酵母小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Anti-RPL12 Antibody人維生C(VC)

大腸埃希菌大鼠載脂蛋白A1Anti-RPL10L Antibody人維生B6(VB6)

猴頭菇大鼠載脂蛋白B100Anti-RPL17 Antibody人維生B6(VB6)

雙色牛肝菌Hpt/HP小鼠16α羥基雌1Anti-RPL15 Antibody人可溶性P選擇(sP-selectin)

長雙歧桿菌嬰兒亞種人抗載脂蛋白抗體A1Anti-RPL12 Antibody人可溶性P選擇(sP-selectin)

大腸埃希氏菌小鼠α1性糖蛋白Anti-RPL18 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)

擬莖點(diǎn)霉大鼠25羥基維生D3Anti-RPL14 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)

北見微桿菌人抗胰島受體抗體Anti-RPL26L1 Antibody人維生D(VD)

球毛殼菌人抗胃壁抗體Anti-RPL27A Antibody人維生D(VD)

四分子交聯(lián)體20抗體四旋蛋白銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)乳腺癌耐藥細(xì)胞

T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞性白血病1蛋白/淋巴瘤蛋白5抗體聚生殼菌人膽管癌耐藥細(xì)胞株

胚胎干細(xì)胞相關(guān)蛋白TXNDC9抗體澳型核果褐腐病菌（斜面）人乳腺癌表柔比星耐藥細(xì)胞株

轉(zhuǎn)錄因子9抗體柿葉輪斑病菌人白血病HL-60細(xì)胞耐藥細(xì)胞株
EGFR抑制劑(Sapitinib)楊鏈格孢 Na-苯甲酰-L-精乙酯鹽酸鹽

淺灰北里孢 復(fù)合氨基酸粉

焦曲霉 6-氨基正己酸

變位艾耳球蟲 磷脂酰絲

黃白側(cè)耳 甘乙酯鹽酸鹽

米曲霉 甘甲酯鹽酸鹽

雞傷寒沙門氏 雙甘氨肽

釀酒酵母 馬尿酸-L-苯

畢赤酵母屬 馬尿酸

卷曲鏈霉 BOC-甘

黃黃色桿 甘

黑曲霉 肌

枯草芽孢桿 L-(-)樟腦磺酸

甲基桿屬 D(-)樟腦磺酸

酮丁梭 ?；撬?nbsp;

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)