大鼠小腦顆粒原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠小腦顆粒細胞分離自小腦皮層組織；神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)基本的結構與功能單位，小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元，直徑約10μm，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富，近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半。由于小腦神經(jīng)元的生長、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似，而且數(shù)量多、便于取材，因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長發(fā)育、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段。小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元，在哺乳動物的小腦內(nèi)數(shù)量為豐富。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯(lián)系，形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路，在小腦的神經(jīng)活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中，病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元，導致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損，從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調(diào)。研究小腦顆粒神經(jīng)元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應、病理發(fā)生的機理特別是分子機理，有賴于小腦顆粒神經(jīng)元細胞模型的建立。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維，正是這種排列保證了興奮的單向傳導，這是小腦功能理論中的關鍵假設，小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑制性突觸的信息傳入。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠小腦顆粒細胞采用蛋白酶消化法結合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠小腦顆粒細胞經(jīng)NSE免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

C6/36 白紋伊蚊細胞  大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12] T淋巴細胞白血病細胞，HuT78細胞 Mv.1.Lu(NBL-7)細胞，貂肺上皮細胞  RPS6KB1 Others Human 人 PS6K / RPS6KB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 小鼠原代子宮微血管內(nèi)皮細胞 人原代脈絡膜微血管內(nèi)皮細胞

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39)(抗原)

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

BID重組小鼠 BID 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

CABP5重組人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein

小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA 試劑盒

Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人2(VD2)試劑盒

HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相關血漿蛋白A(PAPP-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAF試劑盒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

桌面DNA清除溶液500毫升

Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人組織多肽抗原(TPA)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白去乙?；?/span>(HD)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白酶抗體(CathAb)試劑盒   96T/48T

人組織蛋白酶S(cath-S)試劑盒   96T/48T

大鼠小腦顆粒原代細胞豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human iercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 人細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒

HumanHerpesGestation,HGELISAKit 人皰疹抗體(HG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCXC-chemokinereceptor3,CXCR3試劑盒人CXC趨化因子受體3(CXCR3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織FAK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanprocollagenⅠN-terminalpeptide，PⅠNPELISAKit人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標簽) Protein

Ⅹ(F10)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

EFNA4重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

ALOX5AP Protein Human 重組人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 標簽)

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。