人晶狀體上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織；晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層，僅含有上皮細胞及其產(chǎn)物，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開；因而，晶狀體上皮細胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染，保證了培養(yǎng)中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡，包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中，晶狀體上皮細胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內(nèi)部，產(chǎn)生晶體蛋白，自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞，并終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明，晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控，包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形，呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細胞，其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān)，體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。

方法簡介：

公司實驗室分離的人晶狀體上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人晶狀體上皮細胞經(jīng)BFSP2（晶狀體蛋白）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細胞)  CD180 Others Human 人 CD180 / RP105 / LY64 人細胞裂解液   RLFs, 大鼠肺成纖維細胞 R1000細胞 WISH(羊膜細胞)  滑膜細胞Many   IL2RA Others Mouse 小鼠原代心肌干細胞 兔原代輸尿管平滑肌細胞

GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)

IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標簽)

CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白

SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein

兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒

Humanai-gangliosideaibody,GM1ELISAKit 人抗抗體(GM1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanErythropoietin,EPO試劑盒人紅細胞生成素(EPO)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織RSK3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanOsteogenicGrowthPeptide，OGPELISAKit人成骨生長肽(OGP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TFR2 (ansferrin Receptor 2) ELISA Kit

人游離睪(F-TESTO)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit

人轉(zhuǎn)移因子(TF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit

人轉(zhuǎn)運蛋白1(TNPO1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit

人晶狀體上皮原代細胞豚鼠鉤端IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human iercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒

humanβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit 人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclicguanosinemonophosphate,cGMP試劑盒人環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織FGFR3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanprimaryhepaticcarcinoma,PHCELISAKit人肝癌抗原(PHC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 Protein

DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原

STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標簽)

BMPR1A Protein Mouse 重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。