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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>艾美捷—如何選擇合適的SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒?
SAM,也稱為 AdoMet,充當(dāng)修飾蛋白質(zhì)和 DNA 所需的甲基的供體。SAM 的異常水平與許多異常有關(guān),包括阿爾茨海默氏癥、抑郁癥、帕金森氏癥、多發(fā)性硬化癥、肝功能衰竭和癌癥。
市面上,SAM甲基轉(zhuǎn)移酶酶活性分析試劑盒非常少,而且很多都是貼牌而來。如何選擇更加可靠的SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒?
艾美捷G-Biosciences SAM510系列——SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒,提供一種連續(xù)動(dòng)力學(xué)酶偶聯(lián)測(cè)定方法,可連續(xù)監(jiān)測(cè)純化的SAM依賴性甲基轉(zhuǎn)移酶,而無需使用放射性標(biāo)記或終點(diǎn)測(cè)量。 這是用于蛋白SAM甲基轉(zhuǎn)移酶的靈敏的酶偶聯(lián)試驗(yàn)。
1.SAM510: SAM Methyltransferase AssaySAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒(比色法)【GBS-786-430】 100T 樣本:純化的SAM甲基轉(zhuǎn)移酶
2.SAM-fluoro: SAM Methyltransferase Assay SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒(熒光法)【GBS-786-431】100T 樣本:純化的SAM甲基轉(zhuǎn)移酶
說明:
1.試劑盒需干冰運(yùn)輸,-80℃保存
2.可替代長(zhǎng)貨期產(chǎn)品:Sigma,CBA096
3.僅供科研使用,不得用于醫(yī)療.
艾美捷SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒原理:
從SAM中去除甲基會(huì)產(chǎn)生S-腺苷同型半胱氨酸,通過所含的腺苷同型型半胱氨酸核苷酶將其快速轉(zhuǎn)化為S-核糖同型半胱氨酸和腺嘌呤。這種快速轉(zhuǎn)化阻止了腺苷同型半胱氨酸的積累及其對(duì)甲基化反應(yīng)的反饋抑制。最后,腺嘌呤脫氨酶將腺嘌呤轉(zhuǎn)化為次黃-嘌-呤,然后轉(zhuǎn)化為尿酸鹽和過氧化氫。過氧化氫的產(chǎn)生速率通過510nm處吸光度的增加用比色法測(cè)定。由于腺苷高半胱氨酸核苷酶的特異性,該測(cè)定法可適用于任何純化的SAM依賴性甲基轉(zhuǎn)移酶或產(chǎn)生5-腺苷高半胱氨酸或5“-甲硫腺苷的純化酶。
艾美捷SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒特色:
1.純化甲基轉(zhuǎn)移酶的動(dòng)力學(xué)分析或篩選甲基化抑制劑。
2.用于動(dòng)力學(xué)研究的連續(xù)酶偶聯(lián)試驗(yàn)。
3.比色法,非放射性測(cè)定。
4.與所有試劑一起提供,包括陽(yáng)性對(duì)照。
5.適用于產(chǎn)生S-腺苷高半胱氨酸或5 '-甲硫腺苷的酶。
SAM甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析試劑盒-Nature文章鑒賞:
IF=69, 《MMSET regulates histone H4K20 methylation and 53BP1 accumulation at DNA damage sites》,Nature
體外組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定。
用血凝素(HA)標(biāo)記抗體從293T細(xì)胞中表達(dá)并純化了HA-MMSET和HA-53BP1。 重組組蛋白4蛋白來自Upstate。 根據(jù)制造商的說明進(jìn)行體外組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定(SAM510:SAM甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定試劑盒,G-Biosciences)。 簡(jiǎn)而言之,所有蛋白質(zhì)都用0.1M Tris-HCl,pH 8.0透析。 20mM HA-MMSET(或HA-MMSET(S102A)突變體)和20mM H4(或HA-53BP1)用于每個(gè)反應(yīng)。 在37 ℃下每10 - 30秒測(cè)量510nm處的吸光度,直到增加的吸光度達(dá)到平臺(tái)或通過在SDS緩沖液中煮沸終止反應(yīng),通過15% SDS-PAGE分離它們的內(nèi)容物,并通過用抗H4K20Me2抗體(Upstate)進(jìn)行免疫印跡來觀察H4的甲基化。
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