丙二醛（MDA）是常用的膜脂過(guò)氧化指標(biāo)，在酸性和高溫度條件下，可以與TBA反應(yīng)生成紅棕色的三甲川（3，5，5-三甲基惡唑-2，4-二-酮），其最大吸收波長(zhǎng)在532nm。但是測(cè)定植物組織中MDA時(shí)受多種物質(zhì)的干擾，其中最主要的是可溶性糖，糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收波長(zhǎng)在450nm，但532nm處也有吸收。植物遭受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫時(shí)可溶性糖增加，因此測(cè)定植物組織中MDA—TBA反應(yīng)物質(zhì)含量時(shí)一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應(yīng)物在532、450nm處的消光度值，所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應(yīng)中需一定量的鐵離子，通常植物組織中鐵離子的含量為每克千重100—300ug/g，根據(jù)植物樣品量和提取液的體積，加入Fe3+的終濃度為0.5umol/L。

艾美捷丙二醛(MDA)elisa檢測(cè)試劑盒#EKF60157詳細(xì)信息：

編號(hào)：EKF60157

規(guī)格：48T/96T

反應(yīng)性：鼠

范圍：7.813-500ng/ml

靈敏度：4.688ng/ml

應(yīng)用：用于血清、血漿、組織勻漿和其他生物液中MDA的定量檢測(cè)。

儲(chǔ)存：2-8°C，保存6個(gè)月

有效期：見(jiàn)試劑盒標(biāo)簽

注：僅供研究使用。

丙二醛(MDA)elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟：

步驟1：在預(yù)涂板上分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)、試樣、對(duì)照（空白）孔，然后記錄它們的位置。

第2步：在每個(gè)孔中加入50ul標(biāo)準(zhǔn)品或樣品。立即向每個(gè)孔中加入50ul生物素標(biāo)記的抗體，輕輕敲擊

平板以確保充分混合，然后在37°C下孵育45分鐘。

清洗步驟：抽吸并清洗盤(pán)子3次。

步驟3：向每個(gè)孔中加入100ul SABC工作溶液，并在37°C下孵育30分鐘。

清洗步驟：抽吸并清洗盤(pán)子5次。

第4步：添加90ul TMB基質(zhì)溶液。在37°C下培養(yǎng)10-20分鐘。

步驟5：添加50ul停止溶液。在450nm下立即讀取并計(jì)算

分析程序：

稀釋樣品和試劑時(shí)，必須將它們完-全、均勻地混合。在向井中加入TMB之前，平衡TMB

基板在37°C下放置30分鐘。建議為每次測(cè)試?yán)L制一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)、試樣、對(duì)照（空白）孔，然后記錄其位置。它是建議測(cè)量每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品一式兩份。

2.添加樣品和生物素標(biāo)記的抗體：每孔添加50ul標(biāo)準(zhǔn)、空白或樣品?？瞻拙砑訕悠?標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液。立即向每個(gè)孔中加入50ul生物素標(biāo)記的抗體工作溶液。封面為我們提供的封板機(jī)。輕輕拍打盤(pán)子，確保充分混合。在37°C下培養(yǎng)45分鐘。（解決方案添加到微孔板的底部，盡可能避免內(nèi)壁接觸和起泡。）

3.洗滌：取下蓋子，用洗滌緩沖液洗滌板3次，并讓洗滌緩沖液在孔中停留1分鐘每次。最后一次洗滌后，通過(guò)抽吸或潷析去除任何剩余的洗滌緩沖液。