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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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提高蛋白質(zhì)純化效率的利器--His-tag重組蛋白

時(shí)間:2024/2/1閱讀:253
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蛋白質(zhì)折疊是細(xì)胞生物學(xué)中一項(xiàng)復(fù)雜而重要的過(guò)程,確保蛋白質(zhì)的正確結(jié)構(gòu)和功能。分子伴侶蛋白,如熱休克蛋白(HSP),在輔助蛋白質(zhì)折疊和防止蛋白質(zhì)聚集方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在HSP家族中,HSP40,也被稱為DNAJ蛋白,因其參與蛋白質(zhì)折疊途徑而備受關(guān)注。此外,His-Tag重組蛋白的使用徹-底改變了蛋白質(zhì)純化和表征的方法,為研究蛋白質(zhì)折疊機(jī)制提供了寶貴的工具。

 

HSP40與蛋白質(zhì)折疊:

HSP40蛋白是與HSP70協(xié)同作用的輔助伴侶蛋白,其具有保守的J-結(jié)構(gòu)域,負(fù)責(zé)刺激HSP70ATP酶活性,以及其他結(jié)構(gòu)域,介導(dǎo)底物的識(shí)別和相互作用。HSP40蛋白能夠識(shí)別和結(jié)合未折疊或錯(cuò)誤折疊蛋白上的暴露疏水區(qū)域,防止其聚集并促進(jìn)正確折疊。通過(guò)調(diào)節(jié)HSP70ATP酶循環(huán),HSP40確保細(xì)胞環(huán)境中蛋白質(zhì)折疊的高效和質(zhì)量控制。

 

His-Tag重組蛋白與蛋白質(zhì)純化:

His-Tag技術(shù)徹-底改變了蛋白質(zhì)純化和表征的方法。His-Tag是短肽序列,通常由六個(gè)組氨酸殘基組成,與重組蛋白融合。His-Tag使得利用固定金屬親和層析(IMAC)特異而高效地純化蛋白質(zhì)成為可能,其中His-Tag與固定在固體支持上的金屬離子(如鎳或鈷)結(jié)合。這種技術(shù)能夠快速高產(chǎn)地純化His-Tag重組蛋白,便于后續(xù)的結(jié)構(gòu)研究、酶活性測(cè)定和蛋白質(zhì)相互作用分析等應(yīng)用。

 

HSP40His-Tag重組蛋白的相互作用:

His-Tag存在于重組蛋白上可能會(huì)影響其折疊和與分子伴侶蛋白的相互作用。研究表明,His-Tag可能會(huì)影響蛋白質(zhì)的溶解性、穩(wěn)定性和折疊動(dòng)力學(xué)。HSP40蛋白具有底物識(shí)別能力,可以識(shí)別和與帶有His-Tag的蛋白相互作用,協(xié)助其折疊并防止聚集。HSP40J-結(jié)構(gòu)域刺激HSP70ATP酶活性,一旦折疊完成,促使His-Tag重組蛋白從伴侶復(fù)合物中釋放出來(lái)。

 

意義和應(yīng)用:

了解HSP40His-Tag重組蛋白的相互作用對(duì)于蛋白質(zhì)折疊研究和生物技術(shù)應(yīng)用具有重要意義。HSP40可以用于提高表達(dá)和純化過(guò)程中His-Tag重組蛋白的折疊效率和產(chǎn)量。這可以提高蛋白質(zhì)生產(chǎn)的成功率,并有助于研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系。此外,HSP40還可以幫助重新折疊變性或錯(cuò)誤折疊的His-Tag重組蛋白,恢復(fù)其功能活性。

 

作為輔助伴侶蛋白,HSP40在蛋白質(zhì)折疊過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用,確保蛋白質(zhì)的正確折疊并防止聚集。His-Tag重組蛋白的使用革命了蛋白質(zhì)純化,而HSP40His-Tag蛋白的相互作用為提高蛋白質(zhì)折疊效率提供了獨(dú)-特的機(jī)會(huì)。

 

艾美捷HSP40,His-tag重組

貨號(hào):BPS-50285

英文名稱:HSP40, His-tag Recombinant

同義詞HSP40、熱休克蛋白 40DnaJ

物種:人

宿主物種/表達(dá)系統(tǒng):大腸桿菌

純度:≥90%

格式緩沖:水溶液

配方:25 mM Tris-HCl,pH 7.5,400 mM NaCl,0.05% 吐溫-20,10% 甘油和 3 mM DTT。

標(biāo)簽:端 His 標(biāo)簽

 

HSP40, His-tag重組蛋白HSP40, His-tag Recombinant產(chǎn)品數(shù)據(jù):

11.png

 

HSP40, His-tag重組蛋白HSP40, His-tag Recombinant文獻(xiàn)參考:

1. Gibbs SJ, et al. PLoS ONE. 2009;4(2):e4595.

2. Li Z, Srivastava P. Curr Protoc Immunol. 2004 Feb; Appendix 1T. Review

 


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