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基因的表觀遺傳激活或失活在許多重要的人類疾病中,尤其是在癌癥中,扮演著關(guān)鍵角色。
表觀遺傳基因失活的主要機(jī)制是由于 DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶引起的基因組 DNA 中 CpG 島的甲基化。組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMTs)通過染色質(zhì)依賴的轉(zhuǎn)錄抑制或激活來控制或調(diào)節(jié) DNA 甲基化。HMTs 將 1-3 個甲基基團(tuán)從 S-腺苷 - L - 甲硫氨酸轉(zhuǎn)移到組蛋白的賴氨酸和精氨酸殘基上。SETD1 和 MLL 是主要的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶,它們催化哺乳動物細(xì)胞中組蛋白 H3 在賴氨酸 4(H3-K4)處的甲基化,而 KDM 是主要的組蛋白去甲基化酶,負(fù)責(zé)去甲基化 H3K4。三甲基 H3K4(H3K4me3)一直被視為高度轉(zhuǎn)錄基因的標(biāo)志性標(biāo)記,它僅位于啟動子下游的 5' 區(qū)域。H3K4me3 也可以通過抑制或激活 HMTs 來改變。在血漿或血清中觀察到并被證實為許多不同疾病或病理變化(如癌癥進(jìn)展)的標(biāo)記物的循環(huán)組蛋白 H3K4me3。因此,檢測循環(huán) H3K4me3 將為更好地理解基因激活和沉默的表觀遺傳調(diào)控、與組蛋白修飾相關(guān)的病理過程、疾病相關(guān)生物標(biāo)志物的篩選以及開發(fā)針對組蛋白修飾的藥物提供有用的信息。
EpiQuik 循環(huán)三甲基組蛋白 H3K4 ELISA 試劑盒(比色法)是一套經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液和試劑,專門用于定量檢測血漿和血清中的循環(huán)組蛋白 H3K4me3。
艾美捷EpiQuik循環(huán)三甲基組蛋白H3K4 ELISA試劑盒(比色法)(#P-3112-48)優(yōu)勢與特點:
快速高效的實驗流程,可在 2.5 小時內(nèi)完成。
高靈敏度和特異性。檢測限低至 0.5 ng/孔,血漿/血清在指定量范圍內(nèi)(1-20 ng/孔)的動態(tài)范圍。僅識別 H3K4me3,與未修飾的 H3 或同一賴氨酸位點的其他修飾無交叉反應(yīng)。
方便地包含對照,用于 H3K4me3 的定量。
條帶微孔板格式使實驗具有靈活性:可手動或高通量操作。
簡單、可靠且一致的實驗條件。
圖:使用 EpiQuik™ 總組蛋白提取試劑盒(Cat. #OP0006)從 HL-60 細(xì)胞中提取組蛋白,并將其以不同濃度摻入牛血漿中。使用 EpiQuik™ 循環(huán)三甲基組蛋白 H3K4 ELISA 試劑盒(比色法)測定 H3K4me3 的含量。
原理與實驗流程:
該試劑盒用于測量血漿或血清中的總 H3K4me3。使用該試劑盒進(jìn)行實驗時,血漿/血清樣本中 K4 位點三甲基化的組蛋白 H3 蛋白被固定在涂有抗 H3K4me3 抗體的條帶孔中。捕獲的 H3K4me3 蛋白隨后可被檢測抗體識別,再通過顯色試劑進(jìn)行顯色。H3K4me3 的比例與吸光度強(qiáng)度成正比。通過與標(biāo)準(zhǔn)對照比較,可以定量測定 H3K4me3 的絕對量。
起始材料:
起始材料應(yīng)為血漿或血清。每次實驗的血漿或血清用量為 10 至 40 uL,最佳用量為 30 uL。
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