詳細介紹
Toledo 細胞專用培養(yǎng)基
Toledo細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持Toledo細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含Toledo細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Toledo細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
RPMI-1640 基礎培養(yǎng)基 445 mL
特級胎牛血清 50 mL
P/S 5 mL
運輸和保存
運輸 :放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法: 2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇Toledo 細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查Toledo 細胞密度。
2)細胞傳代:如果Toledo 細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗Toledo 細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若Toledo 細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待Toledo 細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
氯離子通道調節(jié)蛋白1A抗體 | 干擾素α21抗體 |
細胞色素氧化酶蛋白5B抗體 | 核孔蛋白NUP160抗體 |
細胞鳥苷酸置換因子NGEF抗體 | 山羊皮膚細胞;WGS1 |
原癌基因酪蛋白激酶受體RET/多發(fā)性內分泌腺瘤和甲狀腺髓樣癌蛋白抗體 | 組織相容性復合體α抗體 |
GRC5蛋白抗體 | 前細胞脹亡受體誘導膜損傷蛋白抗體 |
小鼠腹水瘤細胞;S-180 | FGF18 Others Human 人 FGF18 / FGF-18 人細胞裂解液 (陽性對照) |
PDZ結構域PDZK1蛋白抗體 | 3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞 3T3-L1 mouse embryonic fibroblasts DMEM+10%FBS |
蛋白質酸酶2A-B55抗體 | HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
酸化淋巴細胞衍生C-型凝集素抗體 | 小腸平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
富含絲/精重復結構蛋白抗體 | CM-H136人牙周膜成纖維細胞培養(yǎng)基100mL |
分子伴侶復合體TCP-1β抗體 | 人心臟成纖維細胞-心室HCF-av |
Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | Toledo 細胞專用培養(yǎng)基293細胞,轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞 人肺腺癌細胞,GLC-82細胞 肺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml |
EPHB2 Others Human 人 EphB2 人細胞裂解液 (陽性對照) | 小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞培養(yǎng)基 100mL |
人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] | 體細胞;HEL |
1.使用Toledo 細胞時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本Toledo 細胞的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響Toledo 細胞正常使用。