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詳細(xì)介紹
人原代乳腺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代乳腺成纖維細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代乳腺成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代乳腺成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。
1）復(fù)蘇人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
核酸內(nèi)切酶G抗體 | 黃體激素釋放激素/釋放激素抗體 |
L-型電壓依賴型鈣通道β抗體 | 促進(jìn)凋亡基因抗體 |
非受體酪激酶c-Abl抗體 | 人臍靜脈平滑肌細(xì)胞cDNAHUVSMC cDNA |
ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體 | 聚合酶延伸因子抗體 |
酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體 | 三酸腺苷依賴解旋酶DDX3抗體 |
HCC827(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1 | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM933 |
氨基乙二酸半醛脫氫酶酸泛酰巰基乙胺轉(zhuǎn)移酶抗體 | CL-0040BT-474(人導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
富含亮重復(fù)家庭蛋白4抗體 | 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1) |
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6抗體 | 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF 人肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體 | FCGR1 Others Human 人 CD64 / FCGR1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
維甲酸誘導(dǎo)蛋白17抗體 | 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)(HMSC-bm)(5×105) MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞 Human |
VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人原代乳腺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基CL-0427RL1(大鼠肺成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
CM-H048人胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | SERPINE1 Others Human 人 PAI-1 / SerpinE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
IL13RA1 Others Mouse 小鼠 IL13Ra1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CCL5 Others Human 人 CCL5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1.使用人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會有少量絮狀物析出，不影響人原代乳腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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