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詳細介紹
人原代結腸成纖維細胞專用培養(yǎng)基
人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持人原代結腸成纖維細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產品中已包含人原代結腸成纖維細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用人原代結腸成纖維細胞的培養(yǎng)。
產品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。
1）復蘇人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基密度。
2）細胞傳代：如果人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
內皮單核細胞激活肽2抗體 | 丙肝病毒核心抗原C區(qū)抗體 |
粒體外膜孔蛋白3抗體（電壓依賴陰離子通道蛋白3） | 腫瘤轉移抑制蛋白1 |
雙特異性酪酸化調節(jié)激酶3抗體 | CFSC-3H & 5H細胞，大鼠肝星形細胞 SK-N-SH(母細胞瘤) 大鼠垂體瘤細胞;GH3 |
整合素相關蛋白CD47 | 生長分化因子8抗體 |
戊二酰A脫氫酶抗體 | 乳腺癌擴增序列蛋白4抗體 |
人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | IgG2b Others Mouse 小鼠 IgG2b-Fc 人細胞裂解液 (陽性對照) |
氧化應激誘導生長抑制因子1抗體 | OP9小鼠骨髓基質細胞 OP9 mouse bone marrow somal cells a-MEM培養(yǎng)基+20%FBS |
二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體 | SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
丁酰酯酶抗體(C端) | 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino |
高分子量絲蛋白抗體 | T-102A酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液)1mL |
凝集蛋白家族10抗體（肝） | CM-H054人子宮成纖維細胞培養(yǎng)基100mL |
HCT-15(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 人原代結腸成纖維細胞專用培養(yǎng)基家兔皮膚細胞;DR-S1 母細胞瘤細胞，SH-SY5Y細胞 U14細胞，小鼠子細胞 |
Gibco 12680013 LHC-9 Medium (1X), Liquid 500 ml | 小鼠胃粘膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
HIT-T15 敘利亞倉鼠胰島β細胞 | 蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL |
1.使用人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基時應注意無菌操作，避免污染。
2.本產品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產品請于保質期內使用，超出保質期，必須放棄使用。
5.本產品只供進一步科研使用，不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會有少量絮狀物析出，不影響人原代結腸成纖維細胞培養(yǎng)基正常使用。
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