詳細(xì)介紹
人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
腦酶3抗體 | 乙酰肝素酶抗體 |
粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位酶8A/耳聾/肌張力障礙肽抗體 | GTP結(jié)合蛋白MAS1抗體 |
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端) | HEL299細(xì)胞,紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 巨核細(xì)胞,Dami細(xì)胞 人纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080 |
整合素β1結(jié)合蛋白2抗體 | 慶大單克隆抗體 |
間隙連結(jié)蛋白31.9抗體 | 瘤病毒16型E7抗體 |
EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | ADAM15 Others Human 人 ADAM15 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白Oligophrenin-1抗體 | 鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-Lu 胰腺癌細(xì)胞,PANC-1細(xì)胞 3T3 clone A31細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
二甲基化組蛋白H3K9抗體 | 人骨骼肌星形細(xì)胞(HSkMSC)(5×105) |
B7-H4抗體 | HCT116, 人結(jié)直腸癌細(xì)胞 |
高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體 | PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
細(xì)胞粘附分子2 | 小鼠母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] |
人胚腎細(xì)胞;2V6.11 | 人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基NEC(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 22RV1(前列腺癌細(xì)胞) |
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF-mt)(5×105) | 人肺泡上皮細(xì)胞裂解物HPAEpiCL |
MHCC97-H 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞 | 胎兒真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
1.使用人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響人原代踝或膝滑成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。