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詳細(xì)介紹
人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
雌激素相關(guān)受體β抗體 | 環(huán)指蛋白210抗體 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 | 程序性死亡配體1抗體 |
活化半胺酸蛋白酶蛋白-3抗體 | 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長(zhǎng)RNAHOPC-os miRNA5 μg |
嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗體 | 精加壓素受體2抗體 |
酸化HOMER3蛋白抗體 | DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗體 |
人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4 人胎盤絨毛膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCFBF |
γ-微管蛋白復(fù)合物GCP3抗體 | CL-0143Lncap clone FGC(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
酸化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體 | NCI-H2227(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
葉綠體蛋白酶抗體（植物） | 人成纖維母細(xì)胞-胎兒(HDF-f)( 5×105 ) MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 Mouse |
alpha干擾素誘導(dǎo)蛋白27抗體 | CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
外周髓鞘蛋白-22抗體 | EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基CL-0400NCI-H358(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
人胎盤絨毛膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
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