詳細介紹
小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞專用培養(yǎng)基
小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產品中已包含小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞的培養(yǎng)。
產品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代星形膠質細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代星形膠質細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復蘇小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1) | 軸突相關粘附分子抗體 |
基質金屬蛋白酶13抗體 | 先天性眼外肌纖維化相關蛋白FEOM2抗體 |
保護肽HN抗體 | 肌相關蛋白1抗體 |
異質性核糖核蛋白M抗體 | 同源轉錄因子DLX1抗體 |
生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 | 白細胞介素1受體相關蛋白抗體 |
骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體 | A498人腎癌細胞 Human renal cell carcinoma A498 cells DMEM+10%FBS |
豚鼠胚胎細胞;104C1 | CL-0200RWPE1(人前列腺上皮細胞)5×106cells/瓶×2 |
鋅指蛋白288抗體 | 小鼠成年表皮角質形成層細胞培養(yǎng)基 100mL |
非受體性蛋白酪激酶ETK抗體 | MG-63 人成骨肉瘤細胞 |
S100A2 Others Human 人 S100A2 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人細胞裂解液 (陽性對照) |
肽基異構酶酶FKBP25抗體 | ALCAM Others Human 人 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照) |
型乙酰受體α7抗體 | 小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞專用培養(yǎng)基CL-0089H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞)5×106cells/瓶×2 |
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標簽) | 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu |
人前脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL | 猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A 膠質瘤細胞,SHG44細胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) |
1.使用小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基時應注意無菌操作,避免污染。
2.本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5.本產品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響小鼠原代衛(wèi)星膠質細胞培養(yǎng)基正常使用。